1. ตรวจสอบบรรจุภัณฑ์ตัวอย่างและจับคู่กับคำจารึกบนการพิมพ์หินหรือบนฉลากที่ระบุในเอกสารประกอบ

2. บรรจุภัณฑ์พร้อมตัวอย่างได้รับการทำความสะอาดจากการปนเปื้อน หากได้รับตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่ปิดผนึกอย่างผนึกแน่นเพื่อทำการวิเคราะห์ จะมีการตรวจสอบความแน่นของภาชนะบรรจุ ล้างภาชนะแก้ว โลหะ หรือโพลิเมอร์ที่ปิดสนิทพร้อมกับผลิตภัณฑ์ด้วยน้ำและผงซักฟอก จากนั้นล้างด้วยน้ำสะอาดและผึ่งให้แห้ง บรรจุภัณฑ์ที่รั่วพร้อมกับผลิตภัณฑ์จะถูกเช็ดด้วยสำลีชุบเอทิลแอลกอฮอล์

3. การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ในลักษณะปกติจะดำเนินการในกล่องภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ บรรจุภัณฑ์ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่ดูน่าสงสัยหรือเน่าเสียจะถูกเปิดในห้องแยกต่างหาก

4. ตัวอย่างที่มีผลิตภัณฑ์แช่แข็งจะถูกละลายที่อุณหภูมิ (4 ± 2) °C ก่อนเตรียมตัวอย่าง ตัวอย่างจะถูกเก็บทันทีหลังจากละลาย แต่ไม่เกิน 18 ชั่วโมงหลังจากนั้น อนุญาตให้ละลายตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่อุณหภูมิ 18-20°C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่มีความสม่ำเสมอเป็นเนื้อเดียวกันสามารถละลายได้ในเทอร์โมสตัทที่อุณหภูมิ 35°C โดยมีเงื่อนไขว่าสามารถละลายน้ำแข็งได้อย่างสมบูรณ์ใน มากกว่า 15 นาที

5. การเปิดบรรจุภัณฑ์พร้อมตัวอย่างผลิตภัณฑ์

5.1. ทันทีก่อนที่จะเปิดบรรจุภัณฑ์พร้อมตัวอย่างผลิตภัณฑ์ในภาชนะสำหรับผู้บริโภค ผลิตภัณฑ์ที่ไหลอิสระหรือของเหลวจะผสมโดยการกลับด้านของภาชนะ 10 เท่าจากด้านล่างถึงฝาหรือในลักษณะเป็นวงกลม

5.2. บรรจุภัณฑ์ที่มีตัวอย่างผลิตภัณฑ์ (ยกเว้นอาหารกระป๋อง) เช็ดด้วยไม้พันสำลีที่ชุบเอทิลแอลกอฮอล์ 70% จากนั้นแอลกอฮอล์จะถูกกำจัดออกโดยการระเหยอย่างอิสระ จากนั้นเปิดบรรจุภัณฑ์ คอขวดโลหะหรือขวดแก้วจะถูกไล่ออก และมวล (ปริมาตร) ของผลิตภัณฑ์จะถูกนำไปใช้ในปริมาณที่จำเป็นเพื่อเตรียมตัวอย่างน้อยหนึ่งตัวอย่าง

5.3 บรรจุภัณฑ์ที่มีตัวอย่าง (ถุงฟอยล์ วัสดุโพลีเมอร์ หรือกระดาษ) ถูกเปิดในสถานที่ก่อนหน้านี้ด้วยผ้าเช็ดล้างที่แช่ในแอลกอฮอล์ การเปิดบรรจุภัณฑ์พร้อมตัวอย่างผลิตภัณฑ์ดำเนินการในลักษณะที่ไม่รวมความเป็นไปได้ของการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์และวัตถุรอบข้าง

พื้นผิวของอาหารกระป๋องที่มีลักษณะปกติจะได้รับการบำบัดด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งดังต่อไปนี้:

พื้นผิวของฝาถูกเช็ดด้วยผ้าเช็ดล้างแอลกอฮอล์, ไม้กวาดจะถูกทิ้งไว้บนพื้นผิวและจุดไฟก่อนที่จะเปิดอาหารกระป๋อง;

ฝายางและฝาครอบฟัน Bekelite และฝาพลาสติกได้รับการปฏิบัติในลักษณะเดียวกัน แต่ผ้าอนามัยแบบสอดไม่ได้ติดไฟ

ฝาโลหะ (ปลาย) ขึ้นอยู่กับวัตถุประสงค์ของการวิเคราะห์ เปิดหรือเจาะด้วยหมัด 1-4 ครั้งในบริเวณใกล้เคียงกับไม้กวาดที่ลุกไหม้ ขนาดของรู (เส้นผ่านศูนย์กลางหรือความยาว) ควรเป็น 1-3 ซม.

5.4. บางส่วนของผลิตภัณฑ์ที่ชั่งน้ำหนักแล้วจะถูกหว่านทันทีในอาหารเลี้ยงเชื้อหรือถ่ายโอนไปยังสารละลายเกลือเปปโตนเพื่อเตรียมการเจือจาง

ก่อนเปิดขวดหรือหลอดที่มีฝาเกลียว ให้คลายเกลียวฝาหรือบุชที่ทำเสร็จแล้ว ขอบขวดหรือเยื่อของหลอดถูกเผาด้วยเปลวไฟ เมมเบรนถูกเจาะด้วยมีดผ่าตัดที่ผ่านการฆ่าเชื้อ

ก่อนที่จะเปิดขวดที่ปิดด้วยมงกุฎหรือจุกฟอยล์ บานเกล็ดจะถูกยิงด้วยเปลวไฟของหัวเผา จุกไม้ก๊อกจะถูกเอาออกด้วยกุญแจปลอดเชื้อ ขอบของขวดจะถูกเผาอีกครั้งในเปลวไฟของหัวเผา

เมื่อเปิดขวดด้วยยางปิด การปิดด้วยเอทิลแอลกอฮอล์จะถูกเอาออกโดยไม่มีการยิงเบื้องต้น และขอบขวดจะถูกเผาด้วยเปลวไฟ

5.5. อาหารกระป๋องที่มีลักษณะชำรุดวางบนถาดโลหะ ทันทีก่อนที่จะเก็บตัวอย่างผลิตภัณฑ์ พื้นผิวของฝา (ส่วนท้าย) ได้รับการปฏิบัติในลักษณะที่ระบุในวรรค 5.2 แต่เอทิลแอลกอฮอล์จะไม่ติดไฟ ฝาปิด (หรือปลาย) ที่ผ่านการบำบัดแล้วจะถูกปิดด้วยกรวยโลหะที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วกลับด้าน เพื่อให้กรวยครอบพื้นผิวทั้งหมด ผ่านช่องทางแคบ ๆ เจาะฝา (ปลาย) อย่างระมัดระวังด้วยหมัดที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วสร้างรูเข็ม

แทนที่จะใช้กรวยโลหะ อนุญาตให้ใช้ถุงพลาสติกได้ หลังจากดำเนินการปิดฝา (ส่วนท้าย) อาหารกระป๋องจะถูกใส่ในถุงพลาสติกที่เช็ดด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ก่อนหน้านี้ เพื่อให้ก้นถุงครอบคลุมพื้นผิวที่จะเปิด ถุงมัดแน่นที่ด้านล่าง ด้วยแรงกดเบา ๆ ของหมัดอย่างระมัดระวังรูจะทำพร้อมกันในฝากระป๋องและในถุงพลาสติกกดให้แน่น

หลังจากแก๊สและผลิตภัณฑ์หยุดไหลออกจากโถพร้อมกับผลิตภัณฑ์แล้ว กรวยและถุงจะถูกเอาออก ฝาจะถูกเช็ดอีกครั้งด้วยไม้กวาดฆ่าเชื้อ เจาะรูขยายออก และนำตัวอย่างผลิตภัณฑ์ออกจากโถทันที สำหรับหว่านหรือเตรียมเจือจาง

6. การสุ่มตัวอย่างและการเตรียมการเจือจางเบื้องต้น

6.1. ขึ้นอยู่กับพารามิเตอร์ที่จะกำหนด ส่วนหนึ่งหรือหลายส่วนจะถูกนำมาจากแต่ละตัวอย่างผลิตภัณฑ์เพื่อเตรียมการเจือจางและ/หรือการเพาะเชื้อลงในอาหารเลี้ยงเชื้อ

6.2. มวล (ปริมาตร) ของตัวอย่างที่มีไว้สำหรับการหว่านลงในอาหารเลี้ยงเชื้อและ/หรือเพื่อเตรียมการเจือจางจะต้องกำหนดไว้ในเอกสารกำกับดูแลและทางเทคนิคสำหรับผลิตภัณฑ์หรือวิธีการวิเคราะห์เฉพาะประเภท แต่ต้องมีอย่างน้อย 10 ± 0.1 g (cm 3)

6.3. ตัวอย่างสำหรับการหว่านจะดำเนินการโดยวิธีน้ำหนักหรือปริมาตรทันทีหลังจากเปิดตัวอย่างผลิตภัณฑ์ การเปิดจะดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่ไม่รวมการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์โดยจุลินทรีย์ในบริเวณใกล้เคียงกับเปลวไฟของหัวเผาด้วยเครื่องมือที่ปราศจากเชื้อ

6.4. มีการเลือกตัวอย่างผลิตภัณฑ์เพื่อให้มีส่วนประกอบทั้งหมดและมีอัตราส่วนเดียวกันกับตัวอย่างที่วิเคราะห์

6.5. ในการเตรียมการเจือจางตัวอย่างผลิตภัณฑ์จะใช้สารละลายเกลือเปปโตน อัตราส่วนระหว่างมวล (ปริมาตร) ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์กับปริมาตรของสารละลายเกลือเปปโตนสำหรับการเจือจางครั้งแรกและการเจือจางที่ตามมาคือ:

1: 9 - สำหรับการเจือจาง 10 เท่า (สำหรับผลิตภัณฑ์ที่มีไขมันจำนวนมากโดยไม่มีสารลดแรงตึงผิว 1:10)

1:5 - สำหรับการเจือจาง 6 เท่า

1:3 - สำหรับการเจือจาง 4 เท่า

1:1 - สำหรับการเจือจาง 2 เท่า

หากจำเป็นต้องเจือจางตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่มีไขมันจำนวนมาก อนุญาตให้ใช้สารลดแรงตึงผิว (โซเดียมไบคาร์บอเนต ฯลฯ) ที่ไม่มีฤทธิ์ต้านจุลชีพได้

ในการเตรียมการเจือจางตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่มีแรงดันออสโมติกสูง อนุญาตให้ใช้เปปโทนหรือน้ำกลั่นได้

6.6. การเจือจางเริ่มต้นของตัวอย่างผลิตภัณฑ์จัดทำขึ้นภายใต้สภาวะปลอดเชื้อด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งต่อไปนี้:

การละลายของผลิตภัณฑ์

การเจือจางของผลิตภัณฑ์ที่มีเฟสของเหลว

สารแขวนลอยที่เป็นผง ผลิตภัณฑ์แป้งเปียก และชิ้นผลิตภัณฑ์ที่มีการปนเปื้อนของเชื้อจุลินทรีย์ การทำให้เป็นเนื้อเดียวกันของผลิตภัณฑ์ที่เป็นของแข็ง

6.7. ตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่เป็นของเหลวและของหนืดจะถูกเก็บด้วยปิเปตที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วพร้อมจุกสำลี โดยสอดปิเปตเข้าไปในส่วนลึกของผลิตภัณฑ์

ส่วนของผลิตภัณฑ์ที่เหลืออยู่บนพื้นผิวของปิเปตสามารถระบายออกที่ปลายปิเปตได้ การหยดที่เกิดขึ้นจะถูกลบออกโดยการแตะที่ผนังด้านในของจานหรือภาชนะสำหรับผู้บริโภคเหนือพื้นผิวของผลิตภัณฑ์

ผลิตภัณฑ์ที่มีความหนืดจะถูกขจัดออกจากพื้นผิวของปิเปตด้วยไม้กวาดที่ปราศจากเชื้อ

ส่วนหนึ่งของผลิตภัณฑ์จะถูกถ่ายโอนไปยังภาชนะที่มีสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือเพื่อเตรียมการเจือจางเบื้องต้น เพื่อไม่ให้ปิเปตสัมผัสกับพื้นผิวของสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือ ใช้ปิเปตที่ปราศจากเชื้ออีกอันหนึ่ง ผสมผลิตภัณฑ์กับสารละลายเกลือเปปโตนให้ทั่วถึงโดยเติมและขับออกของส่วนผสมเป็นสิบเท่า

เมื่อทำงานกับผลิตภัณฑ์ที่มีความหนืด ขอแนะนำให้วางลูกบอลแก้วหลายลูกในภาชนะเพื่อให้ผสมกับสารละลายเกลือเปปโตนได้เร็วขึ้น

6.8. ผลิตภัณฑ์ของเหลวที่อิ่มตัวด้วยคาร์บอนไดออกไซด์ (CO 2 ) จะถูกถ่ายโอนไปยังขวดทรงกรวยหรือภาชนะอื่นที่ปราศจากเชื้อและถูกทำให้ร้อนด้วยการกวนเป็นวงกลมบ่อยครั้งในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 30 ถึง 37 ° C จนกระทั่งไม่มีอีกต่อไป จะมีฟองแก๊สออกมา

มีการเก็บตัวอย่างผลิตภัณฑ์และดำเนินการตามข้อ 6.7

6.9. ตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่เป็นผงหรือผลิตภัณฑ์จำนวนมากจะถูกนำด้วยช้อนหรือไม้พายที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วจากที่ต่างๆ ของผลิตภัณฑ์ (หากจำเป็น ชั้นบนสุดของผลิตภัณฑ์ 2 ซม. จะถูกลบออกด้วยช้อนที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว) จากนั้นตัวอย่างจะถูกส่งไปยังห้องก่อน ชั่งน้ำหนักภาชนะปลอดเชื้อพร้อมฝาปิด ชั่งน้ำหนัก สารละลายเกลือเปปโตนถูกเติมลงในตัวอย่างในปริมาณที่จำเป็นเพื่อเตรียมการเจือจางเริ่มต้น ส่วนผสมถูกกวนหรือเขย่า 25 ครั้งเป็นวงกลมโดยมีรัศมี 30 ซม. จนได้เนื้อผลิตภัณฑ์ที่เป็นเนื้อเดียวกัน

หากผลิตภัณฑ์ที่เป็นผงไม่ละลายในน้ำ หลังจากผสมกับสารละลายเกลือเปปโตนแล้ว สารแขวนลอยที่เป็นผลลัพธ์จะถูกปล่อยให้ตกตะกอนเป็นเวลา 10 นาที และเขย่าอย่างแรงอีกครั้งเป็นเวลา 1 นาที

6.10. ตัวอย่างส่วนหนึ่งของผลิตภัณฑ์ที่บวมน้ำได้ถูกนำมาและเตรียมการเจือจางเบื้องต้นตามข้อกำหนดของเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิคสำหรับผลิตภัณฑ์บางประเภท

6.11. ตัวอย่างผลิตภัณฑ์ของแข็งที่ละลายน้ำได้จะถูกเก็บด้วยไม้พายหรือช้อนหลังจากบด บด หรือบดภายใต้สภาวะปลอดเชื้อแล้วดำเนินการตามข้อ 6.9

ตัวอย่างจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์ของแข็งที่ไม่ละลายน้ำจะถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในกรณีที่ระบุไว้ในเอกสารกำกับดูแลและทางเทคนิค เมื่อทำให้ผลิตภัณฑ์เป็นเนื้อเดียวกันจำนวนรอบทั้งหมดของ Homogenizer ควรอยู่ที่ 15-20,000 จำนวนรอบของ Homogenizer ไม่ควรน้อยกว่า 8,000 และมากกว่า 45,000 รอบต่อนาที

อนุญาตให้ทำให้ผลิตภัณฑ์ที่ไม่ผ่านการฆ่าเชื้อเป็นเนื้อเดียวกันได้โดยการบดจนเป็นเนื้อเดียวกันในมอร์ตาร์ปลอดเชื้อภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ

6.12. นำตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่เป็นแป้งเปียกมาผสมให้เข้ากันด้วยช้อนหรือแท่งแก้ว จากนั้นจึงดำเนินการตามข้อ 6.9

6.13. ตัวอย่างไขมันเหลวจะถูกเก็บด้วยปิเปตอุ่นๆ ที่ให้ความร้อนด้วยการเผา หลังจากเติมผลิตภัณฑ์ลงในปิเปตแล้ว ส่วนที่เหลือจะถูกลบออกจากพื้นผิวของปิเปตด้วยไม้กวาดที่ปราศจากเชื้อ

ผลิตภัณฑ์จากปิเปตถูกใส่ลงในจานที่มีจุกแก้วและเจือจางด้วยสารละลายเกลือเปปโตนตามปริมาณที่ต้องการซึ่งให้ความร้อนถึง 40-45°C; เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์ psychrophilic อุณหภูมิไม่ควรเกิน 37 ° C คราบไขมันที่เกาะอยู่บนปิเปตจะถูกล้างด้วยสารละลายเกลือเปปโตน ซึ่งจะถูกดูดหลายครั้งและปล่อยออกจากปิเปต

6.14. ตัวอย่างไขมันแข็งจะถูกนำมาหลังจากตัดผลิตภัณฑ์ด้วยมีดหรือลวดออกเป็นหลายส่วน หากจำเป็น ให้ถอดชั้นบนสุดออก

ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ถูกนำมาจากพื้นผิวของการตัดจากสถานที่ต่าง ๆ ด้วยมีดผ่าตัดและถ่ายโอนไปยังจานชั่งที่มีฝาปิด

ตัวอย่างจำนวนหนึ่งจะถูกส่งไปยังจานปากกว้างที่มีจุกแก้วแบบกราวด์ ส่วนที่เหลือของไขมันที่เกาะติดกับผนังของจานจะถูกล้างในจานเดียวกันด้วยสารละลายเกลือเปปโตนจำนวนหนึ่งที่อุ่นถึง 40-45 ° C ซึ่งจะถูกเพิ่มเข้าไปในจานในปริมาณที่จำเป็นเพื่อให้ได้การเจือจางเริ่มต้น

จากไขมันแข็ง สามารถเลือกตัวอย่างได้ตามปริมาตร ไขมันละลายในจานที่มีคอกว้างในอ่างน้ำที่อุณหภูมิไม่เกิน 45 องศาเซลเซียส เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์ psychrophilic อุณหภูมิไม่ควรเกิน 37 ° C

หลังจากผสมไขมันที่ละลายแล้ว ปิเปตอุ่นจะถูกถ่ายโอนไปยังจานปากกว้างที่มีฝาแก้วบดซึ่งมีสารละลายเกลือเปปโตนในปริมาณที่ต้องการเพื่อเตรียมการเจือจางเบื้องต้น สารละลายเกลือเปปโตนอุ่นที่อุณหภูมิ 40-45°C; เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์ที่ออกฤทธิ์ต่อจิตถึง 37°C

6.15 น. ตัวอย่างจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์วิปปิ้งหรือเนื้อเนียนที่มีไขมันจำนวนมากหลังจากกวนด้วยแท่งแก้วแล้วให้นำช้อนใส่จานที่ชั่งน้ำหนักแล้วเติมสารละลายเกลือเปปโตนที่ร้อนถึง 40-45 ° C ใน ปริมาณที่จำเป็นในการเตรียมการเจือจางเริ่มต้น

6.16 น. การตรวจสอบการปนเปื้อนของเชื้อจุลินทรีย์ที่พื้นผิวของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ทำได้โดยการล้างด้วยก้านสำลี

สำลีปลอดเชื้อชุบสารละลายเกลือเปปโตนแล้วเช็ดในจุดต่างๆ บนพื้นผิวของชิ้นส่วนต่างๆ ของผลิตภัณฑ์ที่วิเคราะห์ด้วยพื้นที่รวม 100 ซม. 2 .

พื้นที่ผิวที่จะวิเคราะห์วัดโดยใช้แม่แบบปลอดเชื้อที่มีรูขนาดเหมาะสม

ไม้กวาดวางในภาชนะที่มีสารละลายเกลือเปปโตนอย่างน้อย 100 ซม. ปิดจานด้วยจุกยางและเขย่าจนกว่าเศษผ้าจะแตกตัวเป็นเส้นใยแต่ละเส้น การระงับที่เกิดขึ้นถือเป็นการเจือจางเดิม

7. การเตรียมการเจือจางสิบเท่า

7.1. การเจือจางตัวอย่างแรกเป็นสิบเท่าเป็นการเจือจางเริ่มต้น การเจือจางเริ่มต้นจัดทำขึ้นตามวรรค 6 การเจือจางที่ตามมาจะได้มาจากการเจือจาง

7.2. การเจือจางครั้งที่สองที่ตามมาเตรียมจากส่วนหนึ่งของการเจือจางดั้งเดิมและสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือเก้าส่วนโดยผสมในหลอดทดลอง

หากใช้ปิเปตเพื่อผสมการเจือจางเริ่มต้น ปิเปตเดียวกันจะถูกใช้เพื่อเติมการเจือจางเริ่มต้น 1 ซม. 3 ลงในสารละลายเกลือเปปโตน 9 ซม. 3 โดยไม่ต้องสัมผัสพื้นผิวของสารละลายด้วยปิเปต การเจือจางผสมกับปิเปตอื่นโดยการดูดและเป่าเนื้อหาของหลอดสิบครั้ง

7.3. การเจือจางครั้งที่สามและครั้งต่อ ๆ ไปจัดทำในลักษณะเดียวกัน

7.4. ช่วงเวลาระหว่างการเตรียมส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์ การเจือจาง และการหว่านในอาหารเลี้ยงเชื้อไม่ควรเกิน 30 นาที

การเลือกตัวอย่างโดยเฉลี่ยเมื่อวิเคราะห์ชุดผลิตภัณฑ์ จะมีการเตรียมตัวอย่างโดยเฉลี่ย สำหรับผลิตภัณฑ์อาหารต่างๆ จะมีการสร้างบรรทัดฐานของตัวอย่างเฉลี่ยที่เลือกและกฎสำหรับการเลือก อย่างไรก็ตาม ในทุกกรณีจำเป็นต้องปฏิบัติตามเงื่อนไขที่ไม่รวมการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์ทดสอบด้วยจุลินทรีย์แปลกปลอม

ในการศึกษาผลิตภัณฑ์ของเหลวและกึ่งของเหลว (นม ครีมเปรี้ยว ซอสปรุงรส ฯลฯ) พวกเขาจะผสมให้ละเอียดแล้วนำไปตักฆ่าเชื้อขนาด 50-100 ซม. 3 ลงในจานปลอดเชื้อ ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่มีความหนาแน่นสูง (เนื้อสัตว์ ไส้กรอก ปลา ผลิตภัณฑ์สำหรับทำอาหาร ฯลฯ) จะนำมาจากความหนาของผลิตภัณฑ์ในที่ต่างๆ ก่อนหน้านี้ พื้นผิวของบริเวณที่ศึกษาถูกกัดกร่อนด้วยมีดร้อนและทำแผลลึกพร้อมกับมีดผ่าตัดที่ปราศจากเชื้อ ขอบของรอยบากจะถูกแยกออกจากกันโดยใช้แหนบที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว และผลิตภัณฑ์ชิ้นเล็ก ๆ จะถูกตัดออกด้วยกรรไกรที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว ตัวอย่างที่เลือกด้วยวิธีนี้จากสถานที่ต่างๆ จะถูกบด รวบรวมในภาชนะปลอดเชื้อและประกอบด้วยตัวอย่างโดยเฉลี่ย

เมื่อทำการสุ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์โดยเฉลี่ยเช่นเนย, คอทเทจชีส, ชีส, โพรบที่ผ่านการฆ่าเชื้อจะถูกใช้ซึ่งสอดเข้าไปในผลิตภัณฑ์จากปลายด้านหนึ่งและนำไปยังด้านตรงข้ามที่ลึกและเอียง จากนั้นใช้มีดผ่าตัดที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว ชิ้นส่วนต่างๆ จะถูกนำมาจากหลายๆ ที่ของตัวอย่างตามความยาวของโพรบ นำมาบดและวางในจานที่ผ่านการฆ่าเชื้อ

การเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์เมื่อตรวจสอบผลิตภัณฑ์ที่มีความหนาแน่นสูง ตัวอย่าง 1-10 กรัมจะถูกนำมาจากตัวอย่างโดยเฉลี่ย ถ่ายโอนไปยังครกที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วบดให้ละเอียด หากผลิตภัณฑ์มีความหนาแน่นมากให้บดด้วยทรายควอทซ์ที่อุ่นแล้ว เติมผลิตภัณฑ์ที่โขลกลงในกระติกน้ำที่มีน้ำเกลือปราศจากเชื้อ (สารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85%) 99 หรือ 90 ซม. 3 เขย่าขวดเบาๆ เป็นเวลา 5 นาที ได้รับการเจือจางครั้งแรกของผลิตภัณฑ์ (1:10) ในขวดซึ่งเตรียมการเจือจางที่ตามมา

ส่วนหนึ่งของเนยละลายในอ่างน้ำที่อุณหภูมิไม่เกิน45º C หลังจากนั้นผลิตภัณฑ์ 1 ซม. 3 จะถูกเติมด้วยปิเปตที่ปราศจากเชื้อในน้ำเกลือ 9 ซม. 3 โดยได้รับการเจือจาง 1:10

เพื่อศึกษาผลิตภัณฑ์ที่เป็นของเหลวและกึ่งของเหลวจากตัวอย่างโดยเฉลี่ย หลังจากการผสมอย่างละเอียดแล้ว ให้นำปิเปตปราศจากเชื้อ 1 ซม. 3 และใส่ลงในหลอดทดลองที่มีน้ำเกลือปราศจากเชื้อ 9 ซม.

การเตรียมการเจือจางผลิตภัณฑ์อาหารอาจมีจุลินทรีย์จำนวนมาก ดังนั้นเพื่อให้ได้โคโลนีที่แยกได้ จึงจำเป็นต้องเตรียมการเจือจางผลิตภัณฑ์เป็นสิบเท่า ในการเตรียมการเจือจาง ให้เทน้ำก๊อกหรือน้ำเกลือที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วลงในหลอดทดลองแห้งปราศจากเชื้อขนาด 9 ซม. 3 ที่มีจุกปิด

การเจือจางผลิตภัณฑ์ครั้งแรกที่เกิดขึ้นจะถูกผสมอย่างทั่วถึงกับปิเปตใหม่ที่ปราศจากเชื้อ นำเข้าและปล่อยสารแขวนลอยที่เป็นผลออกมา ขั้นตอนนี้ดำเนินการ 3-5 ครั้ง จากนั้น 1 ซม. 3 ของสารแขวนลอยจะถูกใช้ปิเปตเดียวกันและถ่ายโอนไปยังหลอดทดลองที่สองที่มีน้ำเกลือปราศจากเชื้อ 9 ซม. รับการเจือจางครั้งที่สอง (1:100) ต้องไม่แช่ปิเปตในของเหลวเพื่อหลีกเลี่ยงการชะล้างจุลินทรีย์ออกจากพื้นผิวด้านนอก ผสมเนื้อหาของการเจือจางครั้งที่สองกับปิเปตที่ปราศจากเชื้อใหม่อย่างละเอียด รวบรวม 1 ซม. 3 และถ่ายโอนไปยังหลอดทดลองถัดไปด้วยน้ำปราศจากเชื้อ 9 ซม. ได้รับการเจือจางครั้งที่สาม (1:1000) การเจือจางที่ตามมาจะถูกเตรียมในลักษณะเดียวกันจนกว่าจะได้ปริมาณที่ต้องการ ควรใช้ปิเปตที่ผ่านการฆ่าเชื้อแยกต่างหากเพื่อเตรียมการเจือจางแต่ละครั้ง

การเพาะเมล็ดในจานเลี้ยงเชื้อในการตรวจสอบ QMAFAnM จะใช้วิธีการเพาะลึกบนอาหารที่มีสารอาหารหนาแน่น รูปแบบการหว่านแสดงในรูปที่ 3

ด้วยปิเปตที่ปราศจากเชื้อ 1 ซม. 3 ของการเจือจางที่เหมาะสมของสารแขวนลอยจะถูกนำมาจากหลอดทดลองและถ่ายโอนไปยังจานเพาะเชื้อที่ว่างเปล่า 2-3 ใบ 15 นาทีหลังจากการเจือจางสารแขวนลอยถ้วยจะถูกเทด้วยสารอาหาร ในการทำเช่นนี้เหนือเปลวไฟของตะเกียงแอลกอฮอล์ไม้ก๊อกจะถูกลบออกจากหลอดทดลองหรือขวดที่มีสารอาหารละลายและทำให้เย็นลงที่ 45-50 ° C และขอบจะถูกเผา จากนั้นเปิดฝาถ้วยเพื่อให้เฉพาะส่วนคอขวดเข้าไปและเทอย่างระมัดระวังใน 10-15 ซม. 3 PS ความหนาของชั้นควรอยู่ที่ประมาณ 5 มม. ปิดฝาถ้วยและทันทีที่มีการเคลื่อนไหวแบบหมุนเบา ๆ ของถ้วยสารอาหารจะผสมกับหัวเชื้อหลังจากนั้นทิ้งไว้ 10-15 นาทีในแนวนอนเพื่อให้อาหารแข็งตัว ถ้วยที่เพาะแล้วคว่ำลงและวางในเทอร์โมสตัทที่อุณหภูมิ 37 ± 1 ° C เป็นเวลา 24-48 ชั่วโมง

การนับอาณานิคมที่เติบโตหลังจากการบ่ม เพลตที่มีโคโลนีเพิ่มขึ้น 30 ถึง 300 โคโลนีจะถูกเลือกและนับด้วยสายตาหรือใช้อุปกรณ์นับโคโลนีพิเศษ เมื่อนับจำนวนโคโลนี จานจะถูกมองด้วยแสงส่องผ่าน และโคโลนีที่นับได้จะถูกทำเครื่องหมายด้วยหมึกหรือหมึก จำนวนจุลินทรีย์ใน 1 ซม. 3 (หรือ 1 กรัม) ของผลิตภัณฑ์ (QMAFAnM) ถูกกำหนดเป็นผลคูณของจำนวนโคโลนีที่ปลูก (N) โดยดัชนีการเจือจาง (n):

QMAFAnM \u003d N 10 n CFU / ซม. 3

จุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจนไม่ได้กำหนดโดยวิธีเพลต เนื่องจากต้องสร้างสภาวะแบบไม่ใช้ออกซิเจนเพื่อการเพาะปลูก การเพาะปลูกแบบไม่ใช้ออกซิเจนนั้นดำเนินการแบบไม่ใช้ออกซิเจน

7. ข้อ จำกัด ของระยะเวลาที่ถูกต้องถูกลบออกโดยกฤษฎีกาของมาตรฐานของรัฐของสหภาพโซเวียตที่ 01.23.91 N 38

8. EDITION (เมษายน 2010) พร้อมการแก้ไขครั้งที่ 1 ได้รับการอนุมัติในเดือนกันยายน 1989 (IUS 12-89)


มาตรฐานสากลนี้ใช้กับผลิตภัณฑ์อาหารและเครื่องปรุงรส และระบุการเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา

คำศัพท์ที่ใช้ในมาตรฐานและคำอธิบายระบุไว้ในภาคผนวก 1

1. อุปกรณ์ น้ำยา และวัสดุ

1.1. เมื่อเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ จะใช้อุปกรณ์ รีเอเจนต์ และวัสดุต่อไปนี้:

อ่างอาบน้ำ;

Homogenizer, เครื่องผสมในห้องปฏิบัติการหรือครกพอร์ซเลนตาม GOST 9147

อุปกรณ์กรองเมมเบรน

เตาแก๊สหรือแอลกอฮอล์ตาม GOST 25336

ช่องทางโลหะ

ต่อย;

ที่เปิดขวด;

ที่เปิดกระป๋อง;

กรรไกร, มีดผ่าตัด, แหนบตาม GOST 21241, ไม้พาย, ช้อน;

ลายฉลุ (แม่แบบ);

หลอดทดลองตาม GOST 25336;

ขวดตาม GOST 25336;

ปิเปตตาม NTD;

จุกยาง

ลูกแก้ว

เอทิลแอลกอฮอล์ที่ผ่านการแก้ไขตาม GOST 5962*; 70%;
________________
* ในอาณาเขตของสหพันธรัฐรัสเซีย ใช้ GOST R 51652-2000


ถุงพลาสติก;

ผงซักฟอก

โซเดียมคลอไรด์ตาม GOST 4233;

เปปโทนเพื่อวัตถุประสงค์ทางแบคทีเรียตาม GOST 13805

เครื่องมือและพื้นผิวของอุปกรณ์ที่สัมผัสโดยตรงกับผลิตภัณฑ์ต้องได้รับการฆ่าเชื้อด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งที่ระบุไว้ใน GOST 26668

1.2. การเตรียมสารละลายเกลือเปปโตน

เตรียมสารละลายเกลือเปปโตนดังนี้: โซเดียมคลอไรด์ 8.5 กรัมและเปปโตน 1.0 กรัมละลายในน้ำกลั่น 1 dm โดยให้ความร้อนช้า หากจำเป็น สารละลายที่ได้จะถูกกรองผ่านตัวกรองกระดาษ ปรับค่า pH 7.0 ± 0.1 เทลงในขวดแก้ว หลอดทดลอง หรือภาชนะอื่นๆ ปิดผนึกและฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ (121 ± 1) °C เป็นเวลา 30 นาที

สารละลายจะถูกเก็บไว้ในที่มืดที่อุณหภูมิ (4 ± 2) °C เป็นเวลาไม่เกิน 30 วันภายใต้สภาวะที่ไม่รวมการระเหยของความชื้น

อุณหภูมิของสารละลายเกลือเปปโตนควรสอดคล้องกับอุณหภูมิของผลิตภัณฑ์ที่วิเคราะห์

1.3. การเตรียมน้ำเปปโตน

น้ำเปปโตนถูกเตรียมในลักษณะเดียวกับสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือโดยไม่ต้องเติมโซเดียมคลอไรด์

2. การเตรียมตัวอย่างเพื่อการวิเคราะห์

2.1. บรรจุภัณฑ์ตัวอย่างได้รับการตรวจสอบและจับคู่กับคำจารึกบนการพิมพ์หินหรือบนฉลากที่ระบุในเอกสารประกอบ

2.2. บรรจุภัณฑ์ที่มีตัวอย่างได้รับการทำความสะอาดจากสิ่งปนเปื้อน หากได้รับตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่ปิดผนึกอย่างผนึกแน่นเพื่อทำการวิเคราะห์ จะมีการตรวจสอบความแน่นของภาชนะบรรจุ ความแน่นของอาหารกระป๋องถูกกำหนดตาม GOST 8756.18 ความแน่นของภาชนะโพลิเมอร์กับผลิตภัณฑ์เช่นเดียวกับอาหารกระป๋องที่ปิดฝาด้วยเมมเบรนยืดหยุ่น (ปุ่ม) - มองเห็นได้ พื้นผิวของเมมเบรนยืดหยุ่นควรเว้าเข้าด้านใน ล้างภาชนะแก้ว โลหะ หรือโพลิเมอร์ที่ปิดสนิทพร้อมกับผลิตภัณฑ์ด้วยน้ำและผงซักฟอก จากนั้นล้างด้วยน้ำสะอาดและผึ่งให้แห้ง บรรจุภัณฑ์ที่รั่วพร้อมกับผลิตภัณฑ์จะถูกเช็ดด้วยสำลีชุบเอทิลแอลกอฮอล์

อาหารกระป๋องจะถูกควบคุมอุณหภูมิทันทีก่อนการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา

อาหารกระป๋องอยู่ภายใต้การควบคุมอุณหภูมิ:

ปิดผนึกอย่างมิดชิด ปราศจากข้อบกพร่องในรูปลักษณ์ ออกแบบมาเพื่อกำหนดความปลอดเชื้อทางอุตสาหกรรมของผลิตภัณฑ์กระป๋องและความคงตัวทางจุลชีววิทยาของอาหารกระป๋อง

ด้วยปลายที่สั่นและแครกเกอร์ในภาชนะที่ปิดสนิท ซึ่งออกแบบมาเพื่อระบุสาเหตุของข้อบกพร่องเหล่านี้

อาหารกระป๋องที่มีจุดประสงค์เพื่อตรวจหาสารพิษโบทูลินัมในตัว ระเบิด ซึ่งมีสัญญาณของการเน่าเสียทางจุลชีววิทยาและเทอร์โมสตัทรั่วจะไม่อยู่ภายใต้การควบคุมอุณหภูมิ

สำหรับการแสดงกิจกรรมที่สำคัญของจุลินทรีย์ mesophilic aerobic, facultative anaerobic และ anaerobic อาหารกระป๋องจะถูกควบคุมอุณหภูมิที่อุณหภูมิ 30-37 ° C ในภาชนะที่มีความจุสูงสุด 1 dm รวมเป็นเวลาอย่างน้อย 5 วันในภาชนะที่มี a ความจุมากกว่า 1 dm - เป็นเวลาอย่างน้อย 7 วัน

สำหรับการรวมตัวของกิจกรรมที่สำคัญของจุลินทรีย์ที่ชอบความร้อนแบบแอโรบิกแบบไม่ใช้ออกซิเจนแบบไม่ใช้ออกซิเจนและแบบไม่ใช้ออกซิเจนอาหารกระป๋องในภาชนะบรรจุความจุใด ๆ จะถูกควบคุมอุณหภูมิที่ 55-62 ° C เป็นเวลาอย่างน้อย 3 วัน ในระหว่างการควบคุมอุณหภูมิ อาหารกระป๋องจะได้รับการตรวจสอบทุกวัน อาหารกระป๋องที่มีข้อบกพร่องของภาชนะบรรจุจะแสดงทันทีหลังจากตรวจพบถูกนำออกจากเทอร์โมสตัทและบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง หลังจากนั้นจะสังเกตสถานะของภาชนะบรรจุและหากเป็นไปได้ ลักษณะที่ปรากฏของผลิตภัณฑ์จะถูกบันทึก อาหารกระป๋องในภาชนะที่มีลักษณะปกติหลังจากทำความเย็นที่อุณหภูมิห้องจะถือว่าไม่มีตำหนิและยังคงรักษาอุณหภูมิต่อไป

หลังจากควบคุมอุณหภูมิอาหารกระป๋องและทำให้เย็นลงที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 24 ชั่วโมงแล้ว ให้สังเกตสภาพของภาชนะบรรจุและรูปลักษณ์ของผลิตภัณฑ์ หากเป็นไปได้

ข้อบกพร่องในอาหารกระป๋องแสดงอยู่ในภาคผนวก 2

2.3. การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของตัวอย่างที่มีลักษณะปกติของผลิตภัณฑ์ดำเนินการในกล่องภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ บรรจุภัณฑ์ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่ดูน่าสงสัยหรือเน่าเสียจะถูกเปิดในห้องแยกต่างหาก

การเตรียมกล่องอธิบายไว้ในภาคผนวก 3

2.2, 2.3. (ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1).

2.4. ตัวอย่างที่มีผลิตภัณฑ์แช่แข็งจะละลายที่อุณหภูมิ (4 ± 2) °C ก่อนเตรียมตัวอย่าง เก็บตัวอย่างทันทีหลังจากละลาย แต่ไม่เกิน 18 ชั่วโมงหลังจากเริ่มละลาย

อนุญาตให้ละลายตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่อุณหภูมิ 18-20 °C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง

ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่มีความสม่ำเสมอเป็นเนื้อเดียวกันอาจละลายในเทอร์โมสตัทที่อุณหภูมิ 35 °C โดยมีเงื่อนไขว่าสามารถละลายน้ำแข็งได้อย่างสมบูรณ์ภายในเวลาไม่เกิน 15 นาที

2.5. การเปิดบรรจุภัณฑ์พร้อมตัวอย่างผลิตภัณฑ์

2.5.1. ทันทีก่อนเปิดบรรจุภัณฑ์ที่มีตัวอย่างผลิตภัณฑ์ในภาชนะบรรจุสำหรับผู้บริโภค แบบไหลอิสระหรือมีสถานะเป็นของเหลว ให้ผสมโดยกลับด้านของภาชนะ 10 เท่าจากด้านล่างถึงฝาหรือในลักษณะเป็นวงกลม

2.5.2. บรรจุภัณฑ์ที่มีตัวอย่างผลิตภัณฑ์ (ยกเว้นอาหารกระป๋อง) เช็ดด้วยไม้พันสำลีที่ชุบเอทิลแอลกอฮอล์ 70% แอลกอฮอล์จะถูกเผาหรือกำจัดออกโดยการระเหยอย่างอิสระ จากนั้นเปิดบรรจุภัณฑ์ คอขวดโลหะหรือขวดแก้วจะถูกไล่ออก และมวล (ปริมาตร) ของผลิตภัณฑ์จะถูกนำไปใช้ในปริมาณที่จำเป็นเพื่อเตรียมตัวอย่างน้อยหนึ่งตัวอย่าง

2.5.3. บรรจุภัณฑ์ที่มีตัวอย่าง (ถุงที่ทำจากกระดาษฟอยล์ วัสดุโพลิเมอร์ หรือกระดาษ) จะถูกเปิดในสถานที่ซึ่งก่อนหน้านี้ใช้ไม้พันสำลีชุบแอลกอฮอล์ การเปิดบรรจุภัณฑ์พร้อมตัวอย่างผลิตภัณฑ์จะดำเนินการในลักษณะที่ไม่รวมความเป็นไปได้ของการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์ วัตถุรอบข้าง และสิ่งแวดล้อม

2.5.4. ก่อนเปิด พื้นผิวของอาหารกระป๋องที่มีลักษณะปกติจะได้รับการบำบัดด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งต่อไปนี้:

สำหรับขวดแก้วฝาจะถูกประมวลผลสำหรับกระป๋องโลหะ - ปลายตรงข้ามกับขวดที่ทำเครื่องหมายไว้

เช็ดพื้นผิวของฝาด้วยผ้าเช็ดล้างแอลกอฮอล์ เช็ดทิ้งไว้บนพื้นผิวและจุดไฟก่อนเปิดอาหารกระป๋อง

ฝายางและฝามงกุฎ Bekelite และฝาพลาสติกก็ผ่านการประมวลผลเช่นกัน แต่ผ้าอนามัยแบบสอดไม่ติด

ฝาโลหะ (ปลาย) ขึ้นอยู่กับวัตถุประสงค์ของการวิเคราะห์ เปิดหรือเจาะด้วยหมัด 1-4 ครั้งในบริเวณใกล้เคียงกับไม้กวาดที่ลุกไหม้ ขนาดของรู (เส้นผ่านศูนย์กลางหรือความยาว) ควรเป็น 1-3 ซม.

ตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่เลือกจะถูกหว่านทันทีในอาหารเลี้ยงเชื้อหรือถ่ายโอนไปยังสารละลายเกลือเปปโตนเพื่อเตรียมการเจือจาง

ก่อนเปิดขวดหรือหลอดด้วยฝาเกลียว ให้คลายเกลียวฝาหรือบุชที่ทำเสร็จแล้ว ขอบขวดหรือเยื่อของหลอดถูกเผาด้วยเปลวไฟ เมมเบรนถูกเจาะด้วยมีดผ่าตัดที่ผ่านการฆ่าเชื้อ

ก่อนที่จะเปิดขวดที่ปิดด้วยมงกุฎหรือจุกฟอยล์ บานเกล็ดจะถูกยิงด้วยเปลวไฟของหัวเผา จุกไม้ก๊อกจะถูกเอาออกด้วยกุญแจปลอดเชื้อ ขอบของขวดจะถูกเผาอีกครั้งในเปลวไฟของหัวเผา

เมื่อเปิดขวดด้วยจุกยาง จุกที่เคลือบด้วยเอทิลแอลกอฮอล์จะถูกเอาออกโดยไม่มีการเผาเบื้องต้น และขอบขวดจะถูกเผาด้วยเปลวไฟ

2.5.5. อาหารกระป๋องที่มีลักษณะชำรุดวางบนถาดโลหะ ทันทีก่อนที่จะเก็บตัวอย่างผลิตภัณฑ์ พื้นผิวของฝา (ส่วนท้าย) ได้รับการปฏิบัติในลักษณะที่ระบุในข้อ 2.5.2 แต่เอทิลแอลกอฮอล์จะไม่ติดไฟ ฝาปิด (หรือปลาย) ที่ผ่านการบำบัดแล้วจะถูกปิดด้วยกรวยโลหะที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วกลับด้าน เพื่อให้กรวยครอบพื้นผิวทั้งหมด ผ่านช่องทางแคบ ๆ เจาะฝา (ปลาย) อย่างระมัดระวังด้วยหมัดที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วสร้างรูเข็ม

แทนที่จะใช้กรวยโลหะ อนุญาตให้ใช้ถุงพลาสติกได้ หลังจากดำเนินการปิดฝา (ส่วนท้าย) อาหารกระป๋องจะถูกใส่ในถุงพลาสติกที่เช็ดด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ก่อนหน้านี้ เพื่อให้ก้นถุงครอบคลุมพื้นผิวที่จะเปิด ถุงมัดแน่นที่ด้านล่าง ด้วยแรงกดเบา ๆ ของหมัดอย่างระมัดระวังรูจะทำพร้อมกันในฝากระป๋องและในถุงพลาสติกกดให้แน่น

หลังจากแก๊สและผลิตภัณฑ์หยุดไหลออกจากโถพร้อมกับผลิตภัณฑ์แล้ว กรวยและถุงจะถูกเอาออก ฝาจะถูกเช็ดอีกครั้งด้วยไม้กวาดฆ่าเชื้อ เจาะรูขยายออก และนำตัวอย่างผลิตภัณฑ์ออกจากโถทันที สำหรับหว่านหรือเตรียมเจือจาง

2.6. การสุ่มตัวอย่างและการเตรียมการเจือจางเบื้องต้น

2.6.1. จากแต่ละตัวอย่างผลิตภัณฑ์ ขึ้นอยู่กับตัวบ่งชี้ที่จะกำหนด ส่วนหนึ่งหรือหลายส่วนจะถูกนำมาใช้เพื่อเตรียมการเจือจางและ/หรือการเพาะเชื้อลงในอาหารเลี้ยงเชื้อ

2.6.2. มวล (ปริมาตร) ของตัวอย่างที่มีไว้สำหรับการหว่านลงในอาหารเลี้ยงเชื้อและ/หรือเพื่อเตรียมการเจือจางต้องกำหนดไว้ในเอกสารกำกับดูแลและทางเทคนิคสำหรับผลิตภัณฑ์หรือวิธีการวิเคราะห์เฉพาะประเภท

2.6.3. ตัวอย่างสำหรับการหว่านจะดำเนินการโดยวิธีน้ำหนักหรือปริมาตรทันทีหลังจากเปิดตัวอย่างผลิตภัณฑ์ การเปิดจะดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่ไม่รวมการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์โดยจุลินทรีย์ในบริเวณใกล้เคียงกับเปลวไฟของหัวเผาด้วยเครื่องมือที่ปราศจากเชื้อ

2.6.4. มีการเลือกตัวอย่างผลิตภัณฑ์เพื่อให้มีส่วนประกอบทั้งหมดและมีอัตราส่วนเดียวกันกับตัวอย่างที่วิเคราะห์

2.6.5. ในการเตรียมการเจือจางตัวอย่างผลิตภัณฑ์จะใช้สารละลายเกลือเปปโตน

อนุญาตให้เตรียมการเจือจางครั้งแรกของผลิตภัณฑ์ที่มี NaCl มากกว่า 5% โดยใช้น้ำเปปโตน การเจือจางครั้งแรกของเนื้อสัตว์ ปลา และผลิตภัณฑ์นม - โดยใช้น้ำเกลือ

น้ำหนัก (ปริมาตร) ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์สำหรับเตรียมการเจือจางเริ่มต้นหรือโฮโมจีเนตต้องมีอย่างน้อย (10±0.1) กรัม/ซม.

อัตราส่วนระหว่างมวล (ปริมาตร) ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์กับปริมาตรของสารละลายเกลือเปปโตนสำหรับการเจือจางครั้งแรกและการเจือจางที่ตามมาคือ:

1:9 - สำหรับการเจือจาง 10 เท่า (สำหรับผลิตภัณฑ์ที่มีไขมันจำนวนมากโดยไม่มีสารลดแรงตึงผิว 1:10)

1:5 - สำหรับการเจือจาง 6 เท่า

1:3 - สำหรับการเจือจาง 4 เท่า

1:1 - สำหรับการเจือจาง 2 เท่า

หากจำเป็นต้องเจือจางตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่มีไขมันจำนวนมาก อนุญาตให้ใช้สารลดแรงตึงผิว (โซเดียมไบคาร์บอเนต ฯลฯ) ที่ไม่มีฤทธิ์ต้านจุลชีพได้

ในการเตรียมการเจือจางตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่มีแรงดันออสโมติกสูง อนุญาตให้ใช้เปปโทนหรือน้ำกลั่นได้

(ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1).

2.6.6. การเจือจางเริ่มต้นของตัวอย่างผลิตภัณฑ์จัดทำขึ้นภายใต้สภาวะปลอดเชื้อด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งต่อไปนี้:

การละลายของผลิตภัณฑ์

การเจือจางของผลิตภัณฑ์ที่มีเฟสของเหลว

การแขวนลอยของแป้ง ผลิตภัณฑ์ที่เป็นแป้งเปียก และพื้นผิวของผลิตภัณฑ์ที่มีการปนเปื้อนของเชื้อจุลินทรีย์

การทำให้เป็นเนื้อเดียวกันของผลิตภัณฑ์ที่เป็นของแข็ง

2.6.7. ตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่เป็นของเหลวและของหนืดจะถูกเก็บด้วยปิเปตที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วพร้อมจุกสำลี โดยสอดปิเปตเข้าไปในส่วนลึกของผลิตภัณฑ์

ส่วนของผลิตภัณฑ์ที่เหลืออยู่บนพื้นผิวของปิเปตสามารถระบายออกที่ปลายปิเปตได้ การหยดที่เกิดขึ้นจะถูกลบออกโดยการแตะที่ผนังด้านในของจานหรือภาชนะสำหรับผู้บริโภคเหนือพื้นผิวของผลิตภัณฑ์

ผลิตภัณฑ์ที่มีความหนืดจะถูกขจัดออกจากพื้นผิวของปิเปตด้วยไม้กวาดที่ปราศจากเชื้อ

ส่วนหนึ่งของผลิตภัณฑ์จะถูกถ่ายโอนไปยังภาชนะที่มีสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือเพื่อเตรียมการเจือจางเบื้องต้น เพื่อไม่ให้ปิเปตสัมผัสกับพื้นผิวของสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือ ใช้ปิเปตที่ปราศจากเชื้ออีกอันหนึ่ง ผสมผลิตภัณฑ์กับสารละลายเกลือเปปโตนให้ทั่วถึงโดยเติมและขับออกของส่วนผสมเป็นสิบเท่า

เมื่อทำงานกับผลิตภัณฑ์ที่มีความหนืด ขอแนะนำให้วางลูกบอลแก้วหลายลูกในภาชนะเพื่อให้ผสมกับสารละลายเกลือเปปโตนได้เร็วขึ้น

2.6.8. ผลิตภัณฑ์ของเหลวที่อิ่มตัวด้วยคาร์บอนไดออกไซด์ (CO) จะถูกถ่ายโอนไปยังขวดทรงกรวยหรือภาชนะอื่นที่ปราศจากสำลีและถูกทำให้ร้อนด้วยการกวนเป็นวงกลมบ่อยครั้งในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 30 ถึง 37 ° C จนกว่าจะหยุดแก๊ส ฟองอากาศจะถูกปล่อยออกมา

มีการเก็บตัวอย่างผลิตภัณฑ์และดำเนินการตามข้อ 2.6.7

2.6.9. ตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่เป็นผงหรือผลิตภัณฑ์จำนวนมากจะถูกนำด้วยช้อนหรือไม้พายที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วจากที่ต่างๆ ของผลิตภัณฑ์ (หากจำเป็น ชั้นบนสุดของผลิตภัณฑ์ 2 ซม. จะถูกลบออกด้วยช้อนที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว) จากนั้นตัวอย่างจะถูกส่งไปยังห้องก่อน ชั่งน้ำหนักภาชนะปลอดเชื้อพร้อมฝาปิด ชั่งน้ำหนัก สารละลายเกลือเปปโตนถูกเติมลงในตัวอย่างในปริมาณที่จำเป็นเพื่อเตรียมการเจือจางเริ่มต้น ส่วนผสมถูกกวนหรือเขย่า 25 ครั้งเป็นวงกลมโดยมีรัศมี 30 ซม. จนได้เนื้อผลิตภัณฑ์ที่เป็นเนื้อเดียวกัน

หากผลิตภัณฑ์ที่เป็นผงไม่ละลายในน้ำ หลังจากผสมกับสารละลายเกลือเปปโตนแล้ว สารแขวนลอยที่เกิดขึ้นจะถูกปล่อยให้ตั้งเป็นเวลา 10 นาที และเขย่าแรงๆ อีกครั้งเป็นเวลา 1 นาที

2.6.10. ตัวอย่างส่วนหนึ่งของผลิตภัณฑ์ที่บวมน้ำได้ถูกนำมาและเตรียมการเจือจางเบื้องต้นตามข้อกำหนดของเอกสารด้านกฎระเบียบและทางเทคนิคสำหรับผลิตภัณฑ์บางประเภท

2.6.11. ตัวอย่างผลิตภัณฑ์ของแข็งที่ละลายน้ำได้จะถูกเก็บด้วยไม้พายหรือช้อน หลังจากบด บด หรือบดภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ และดำเนินการตามข้อ 2.6.9

ตัวอย่างจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์ของแข็งที่ไม่ละลายน้ำจะถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในกรณีที่ระบุไว้ในเอกสารกำกับดูแลและทางเทคนิค เมื่อทำให้ผลิตภัณฑ์เป็นเนื้อเดียวกันจำนวนรอบทั้งหมดของ Homogenizer ควรอยู่ที่ 15-20,000 จำนวนรอบของ Homogenizer ไม่ควรน้อยกว่า 8,000 และมากกว่า 45,000 รอบต่อนาที

หากได้รับมวลที่ต่างกันในระหว่างการทำให้เป็นเนื้อเดียวกันของผลิตภัณฑ์ จะถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันเป็นเวลา 15 นาที และของเหลวส่วนเกินจะถูกใช้สำหรับการเพาะเชื้อและ (หรือ) การเตรียมการเจือจาง

อนุญาตให้ทำให้ผลิตภัณฑ์ที่ไม่ผ่านการฆ่าเชื้อเป็นเนื้อเดียวกันได้โดยการบดจนเป็นเนื้อเดียวกันในมอร์ตาร์ปลอดเชื้อภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ

(ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1).

2.6.12. นำตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่เป็นแป้งเปียกมาผสมให้เข้ากันด้วยช้อนหรือแท่งแก้วและดำเนินการต่อไปตามข้อ 2.6.9

2.6.13. ตัวอย่างไขมันเหลวจะถูกเก็บด้วยปิเปตอุ่นๆ ที่ให้ความร้อนด้วยการเผา หลังจากเติมผลิตภัณฑ์ลงในปิเปตแล้ว ส่วนที่เหลือจะถูกลบออกจากพื้นผิวของปิเปตด้วยไม้กวาดที่ปราศจากเชื้อ

ผลิตภัณฑ์จากปิเปตถูกนำเข้าสู่ภาชนะที่มีจุกแก้วพื้นและเจือจางด้วยสารละลายเกลือเปปโตนในปริมาณที่ต้องการซึ่งให้ความร้อนถึง 40-45 ° C เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์ไซโครฟิลิก อุณหภูมิไม่ควรเกิน 37 °C คราบไขมันที่เกาะอยู่บนปิเปตจะถูกล้างด้วยสารละลายเกลือเปปโตน ซึ่งจะถูกดูดหลายครั้งและปล่อยออกจากปิเปต

2.6.14. ตัวอย่างไขมันแข็งจะถูกนำมาหลังจากตัดผลิตภัณฑ์ด้วยมีดหรือลวดออกเป็นหลายส่วน หากจำเป็น ให้ถอดชั้นบนสุดออก

ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ถูกนำมาจากพื้นผิวของการตัดจากสถานที่ต่าง ๆ ด้วยมีดผ่าตัดและถ่ายโอนไปยังจานชั่งที่มีฝาปิด

ตัวอย่างจำนวนหนึ่งจะถูกส่งไปยังจานปากกว้างที่มีจุกแก้วแบบกราวด์ ส่วนที่เหลือของไขมันที่เกาะติดกับผนังของจานจะถูกล้างในจานเดียวกันด้วยสารละลายเกลือเปปโตนจำนวนหนึ่งที่อุ่นถึง 40-45 ° C ซึ่งจะถูกเพิ่มเข้าไปในจานในปริมาณที่จำเป็นเพื่อให้ได้การเจือจางเริ่มต้น

จากไขมันแข็ง สามารถเลือกตัวอย่างได้ตามปริมาตร ไขมันละลายในจานคอกว้างในอ่างน้ำที่อุณหภูมิไม่เกิน 45 องศาเซลเซียส เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์ไซโครฟิลิก อุณหภูมิไม่ควรเกิน 37 °C

หลังจากผสมไขมันที่ละลายแล้ว ปิเปตอุ่นจะถูกถ่ายโอนไปยังจานปากกว้างที่มีฝาแก้วบดซึ่งมีสารละลายเกลือเปปโตนในปริมาณที่ต้องการเพื่อเตรียมการเจือจางเบื้องต้น สารละลายเกลือเปปโตนอุ่นที่อุณหภูมิ 40-45 องศาเซลเซียส เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์ที่ออกฤทธิ์ต่อจิตถึง 37 °C

2.6.15. หลังจากผสมด้วยแท่งแก้วแล้ว ให้นำตัวอย่างจากผลิตภัณฑ์วิปปิ้งหรือแป้งเหลวที่มีไขมันจำนวนมากมาผสมกับแท่งแก้วลงในจานชั่งน้ำหนัก และเติมสารละลายเกลือเปปโตนที่อุ่นถึง 40-45 °C ใน ปริมาณที่จำเป็นในการเตรียมการเจือจางเริ่มต้น

2.6.16. การตรวจสอบการปนเปื้อนของเชื้อจุลินทรีย์ที่พื้นผิวของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ทำได้โดยการล้างด้วยก้านสำลี

สำลีปลอดเชื้อชุบสารละลายเกลือเปปโตนแล้วถูในจุดต่างๆ บนพื้นผิวของชิ้นส่วนต่างๆ ของผลิตภัณฑ์ที่วิเคราะห์ด้วยพื้นที่รวม 100 ตร.ซม.

พื้นที่ผิวที่จะวิเคราะห์วัดโดยใช้แม่แบบปลอดเชื้อที่มีรูขนาดเหมาะสม

ไม้กวาดวางอยู่ในหลอดทดลองที่มีสารละลายเกลือเปปโตน 10 มล. เนื้อหาของหลอดผสมกับปิเปตอย่างละเอียด การระงับที่เกิดขึ้นถือเป็นการเจือจางเดิม

(ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1).

2.7. การเตรียมการเจือจางสิบเท่า

2.7.1. การเจือจางตัวอย่างแรกเป็นสิบเท่าเป็นการเจือจางเริ่มต้น การเจือจางเริ่มต้นจัดทำขึ้นตามข้อ 2.6 จะได้รับการเจือจางในภายหลัง

2.7.2. การเจือจางครั้งที่สองที่ตามมาเตรียมจากส่วนหนึ่งของการเจือจางดั้งเดิมและสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือเก้าส่วนโดยผสมในหลอดทดลอง

หากใช้ปิเปตเพื่อผสมการเจือจางเริ่มต้น ปิเปตเดียวกันนี้จะถูกใช้เพื่อเติมการเจือจางครั้งแรก 1 ซม.3 ลงในสารละลายเกลือเปปโตน 9 ซม.3 โดยไม่ต้องสัมผัสพื้นผิวของสารละลายด้วยปิเปต การเจือจางผสมกับปิเปตอื่นโดยการดูดและเป่าเนื้อหาของหลอดสิบครั้ง

2.7.3. การเจือจางครั้งที่สามและครั้งต่อ ๆ ไปจัดทำในลักษณะเดียวกัน

2.7.4. ช่วงเวลาระหว่างการเตรียมส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์ การเจือจาง และการหว่านในอาหารเลี้ยงเชื้อไม่ควรเกิน 30 นาที

ภาคผนวก 1 (ข้อมูล) คำที่ใช้ในมาตรฐานและคำอธิบาย

ภาคผนวก 1
อ้างอิง

(ฉบับแก้ไข ฉบับที่ 1).

ภาคผนวก 2 (ข้อมูล) ข้อบกพร่องกระป๋อง

ภาคผนวก 2
อ้างอิง

ข้อบกพร่องในผลิตภัณฑ์กระป๋องคือ:

มองเห็นได้ด้วยตาเปล่า สัญญาณของการพัฒนาของจุลินทรีย์: การหมัก, รา, เมือก, ฯลฯ ;

ตะกอนที่ด้านล่างของกระป๋องหรือที่ขอบของพื้นผิวของผลิตภัณฑ์พร้อมภาชนะ ("วงแหวน");

ความขุ่นของเฟสของเหลว

การแข็งตัว;

เปรี้ยว;

ภายนอก ไม่ใช่ลักษณะของผลิตภัณฑ์ กลิ่น และ (หรือ) รส;

เปลี่ยนสี

ข้อบกพร่องในลักษณะที่ปรากฏของภาชนะบรรจุที่มีผลิตภัณฑ์บรรจุอยู่จะพิจารณา:

สัญญาณการรั่วไหลที่มองเห็นได้ด้วยตาเปล่า: รู รอยร้าว รอยเปื้อน หรือร่องรอยของผลิตภัณฑ์ที่ไหลออกจากกระป๋อง

ระเบิด;

แครกเกอร์;

กระป๋องที่มีปลายสั่น

ตะเข็บกระป๋องที่ออกแบบไม่ถูกต้อง (ลิ้น, ฟัน, การตัดราคา, ตะเข็บปลอม, ตะเข็บม้วน);

สนิมหลังจากกำจัดเปลือกที่เหลืออยู่

ความผิดปกติของร่างกาย, ปลายหรือตะเข็บตามยาวของกระป๋องในรูปแบบของขอบคมและ "นก";

ฝาเบ้บนขวดแก้ว, รอยย่นของฝาปิดตามสนามที่ม้วน, วงแหวนยางที่ยื่นออกมา ("ห่วง");

รอยแตกหรือแก้วบิ่นที่รอยต่อ, ฝาไม่พอดีเมื่อเทียบกับคอกระป๋อง;

การเสียรูป (การเยื้อง) ของฝาขวดแก้วซึ่งทำให้เกิดการละเมิดรอยต่อรอยต่อ

เมมเบรนยืดหยุ่นนูน (ปุ่ม) บนฝาครอบ

ภาคผนวก 3 (ข้อมูล) การเตรียมมวย

ภาคผนวก 3
อ้างอิง

อาหารกระป๋องถูกเปิดในห้องกล่องที่ดัดแปลงเป็นพิเศษสำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา ในกล่อง ไม่ควรมีพื้นผิวที่ไม่สามารถเข้าถึงได้สำหรับการฆ่าเชื้อโรคแบบเปียก และควรไม่รวมการเคลื่อนตัวของอากาศที่เกิดจากกระแสลม ผนัง พื้น และเพดานต้องบุด้วยวัสดุหรือทาสีด้วยน้ำยาฆ่าเชื้อที่ทนทานต่อการบำบัดแบบเปียก สำหรับการฆ่าเชื้อในอากาศกล่องจะติดตั้งหลอดอัลตราไวโอเลตในอัตรา 1.5-2.5 W ต่อ 1 ม.

มีเพียงนักจุลชีววิทยาเท่านั้นที่ทำการวิเคราะห์ และถ้าจำเป็น ควรมีผู้ช่วยอยู่ในกล่อง

กล่องต้องมีโต๊ะและสตูล ไม่ควรมีรายการพิเศษ ยกเว้นรายการที่จำเป็นสำหรับการวิเคราะห์อาหารกระป๋อง

บนโต๊ะควรเป็น:

เตาวิญญาณหรือเตาแก๊ส

ขวดที่มีจุกกราวด์พร้อมแอลกอฮอล์

ขวดปิดฝาด้วยสำลีปลอดเชื้อหนาแน่นที่เตรียมไว้ล่วงหน้าขนาด 3x3 ซม. หรือวงแหวนฝ้าย

ขวดที่มีน้ำยาฆ่าเชื้อ (ชั้นสูง 3 ซม.) สำหรับวางปิเปตหรือหลอดที่ใช้หลังการวิเคราะห์

โลหะขนาดเล็กหรือถาดเคลือบซึ่งวางกระป๋องที่วิเคราะห์ไว้

ปิเปตหรือหลอดที่ปราศจากเชื้อที่ใช้เก็บตัวอย่าง

ควรเก็บอุปกรณ์เสริมไว้ในลิ้นชักของโต๊ะ: แหนบและที่เจาะ หมัดควรมีรูปร่างของหอกที่มีหน้าตัดเป็นรูปสี่เหลี่ยมขนมเปียกปูนที่มีเส้นทแยงมุม 1x1.5 ซม. หรือมีหน้าตัดเป็นรูปสามเหลี่ยมหน้าจั่ว

เมื่อเปิดกระป๋องจำนวนมาก จะใช้หมัดที่ติดตั้งบนขาตั้ง ในกรณีนี้การเปิดทำได้โดยการกดคันโยกบนฝาขวด

ก่อนเปิดขวด หมัดจะลุกเป็นไฟด้วยไม้กวาด

กล่องจะถูกล้างและฆ่าเชื้อทันทีก่อนการวิเคราะห์ (ไม่เร็วกว่า 24 ชั่วโมงก่อนเริ่ม) และหลังจากเสร็จสิ้น การฆ่าเชื้อทำได้โดยการเช็ดพื้นผิวทั้งหมดด้วยคลอรีนหรือสารฆ่าเชื้ออื่น ๆ ตามคำแนะนำที่เกี่ยวข้องกับการเตรียมการแต่ละครั้ง 45 นาทีก่อนเริ่มงานในกล่องเป็นเวลา (30 ± 5) นาที เปิดไฟฆ่าเชื้อแบคทีเรีย

ในปัจจุบัน ตู้กรองแบบลามินาร์โฟลว์ (ตู้ป้องกันอากาศบริสุทธิ์พิเศษ) ใช้สำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา กล่องลามิเนตผลิตโดยโรงงาน Uzhgorod ของอุปกรณ์ทางการแพทย์ "Laminar" กล่องของแบรนด์ BPV 1200 ผลิตในฮังการี กล่องของแบรนด์ TVG-S II 1.14.1 ผลิตโดย Babcock - BSH (เยอรมนี)


ภาคผนวก 2, 3 (แนะนำเพิ่มเติม, รายได้ N 1)

ข้อความอิเล็กทรอนิกส์ของเอกสาร
จัดทำโดย Kodeks JSC และตรวจสอบกับ:
สิ่งพิมพ์อย่างเป็นทางการ
ผลิตภัณฑ์อาหาร อาหารกระป๋อง
วิธีวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา:

นั่ง. GOST - ม.: Standartinform, 2010

GOST 26669-85

มาตรฐานระหว่างรัฐ

อาหารและผลิตภัณฑ์ชิม

การเตรียมตัวอย่างสำหรับจุลชีววิทยา
การวิเคราะห์

วันที่แนะนำ 01.07.86

มาตรฐานสากลนี้ใช้กับผลิตภัณฑ์อาหารและเครื่องปรุงรส และระบุการเตรียมตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา

คำศัพท์ที่ใช้ในมาตรฐานและคำอธิบายระบุไว้ในภาคผนวก

1. อุปกรณ์ น้ำยา และวัสดุ

อุปกรณ์กรองเมมเบรน เตาแก๊สหรือแอลกอฮอล์ GOST 25336 ;

ช่องทางโลหะ ต่อย;

ที่เปิดขวด; ที่เปิดกระป๋อง;

กรรไกร, มีดผ่าตัด, แหนบ GOST 21241, ไม้พาย, ช้อน;

ลายฉลุ (แม่แบบ); หลอดโดย GOST 25336 ;

* ในอาณาเขตของสหพันธรัฐรัสเซีย GOST R 51652-2000.

70%; ถุงพลาสติก; ผงซักฟอก

เปปโทนเพื่อวัตถุประสงค์ทางแบคทีเรีย GOST 13805.

เครื่องมือและพื้นผิวของเครื่องใช้ที่สัมผัสโดยตรงกับผลิตภัณฑ์ต้องได้รับการฆ่าเชื้อด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งที่ระบุไว้ใน GOST 26668.

1.2. การเตรียมสารละลายเกลือเปปโตน

เตรียมสารละลายเกลือเปปโตนดังนี้: โซเดียมคลอไรด์ 8.5 กรัมและเปปโตน 1.0 กรัมละลายในน้ำกลั่น 1 dm 3 โดยให้ความร้อนช้า หากจำเป็น สารละลายที่ได้จะถูกกรองผ่านตัวกรองกระดาษ ปรับค่า pH 7.0 ± 0.1 เทลงในขวดแก้ว หลอดทดลอง หรือภาชนะอื่นๆ ปิดผนึกและฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ (121 ± 1) °C เป็นเวลา 30 นาที

สารละลายถูกเก็บไว้ในที่มืดที่อุณหภูมิ (4 ± 2) °C เป็นเวลาไม่เกิน 30 วันภายใต้สภาวะที่ไม่รวมการระเหยของความชื้น

อุณหภูมิของสารละลายเกลือเปปโตนควรสอดคล้องกับอุณหภูมิของผลิตภัณฑ์ที่วิเคราะห์

1.3. การเตรียมน้ำเปปโตน

น้ำเปปโตนถูกเตรียมในลักษณะเดียวกับสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือโดยไม่ต้องเติมโซเดียมคลอไรด์

2. การเตรียมตัวอย่างเพื่อการวิเคราะห์

2.1. บรรจุภัณฑ์ตัวอย่างได้รับการตรวจสอบและจับคู่กับคำจารึกบนการพิมพ์หินหรือบนฉลากที่ระบุในเอกสารประกอบ

2.3. การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของตัวอย่างที่มีลักษณะปกติของผลิตภัณฑ์ดำเนินการในกล่องภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ บรรจุภัณฑ์ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่ดูน่าสงสัยหรือเน่าเสียจะถูกเปิดในห้องแยกต่างหาก

การเตรียมชกมวยระบุไว้ในภาคผนวก

2.2, 2.3. (ฉบับแก้ไข ฉบับที่ ๑).

2.4. ตัวอย่างที่มีผลิตภัณฑ์แช่แข็งจะละลายที่อุณหภูมิ (4 ± 2) °C ก่อนชั่งน้ำหนัก เก็บตัวอย่างทันทีหลังจากละลาย แต่ไม่เกิน 18 ชั่วโมงหลังจากเริ่มละลาย

อนุญาตให้ละลายตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่อุณหภูมิ 18 - 20 ° C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง

ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่มีความสม่ำเสมอเป็นเนื้อเดียวกันอาจละลายในเทอร์โมสตัทที่อุณหภูมิ 35 °C โดยมีเงื่อนไขว่าสามารถละลายน้ำแข็งได้อย่างสมบูรณ์ภายในเวลาไม่เกิน 15 นาที

2.5. การเปิดบรรจุภัณฑ์พร้อมตัวอย่างผลิตภัณฑ์

2.5.1. ทันทีก่อนเปิดบรรจุภัณฑ์ที่มีตัวอย่างผลิตภัณฑ์ในภาชนะบรรจุสำหรับผู้บริโภค แบบไหลอิสระหรือมีสถานะเป็นของเหลว ให้ผสมโดยกลับด้านของภาชนะ 10 เท่าจากด้านล่างถึงฝาหรือในลักษณะเป็นวงกลม

2.6.1. จากแต่ละตัวอย่างผลิตภัณฑ์ ขึ้นอยู่กับตัวบ่งชี้ที่จะกำหนด ส่วนหนึ่งหรือหลายส่วนจะถูกนำมาใช้เพื่อเตรียมการเจือจางและ/หรือการเพาะเชื้อลงในอาหารเลี้ยงเชื้อ

2.6.2. มวล (ปริมาตร) ของตัวอย่างที่มีไว้สำหรับการหว่านลงในอาหารเลี้ยงเชื้อและ/หรือเพื่อเตรียมการเจือจางจะต้องกำหนดไว้ในเอกสารกำกับดูแลและทางเทคนิคสำหรับผลิตภัณฑ์หรือวิธีการวิเคราะห์เฉพาะประเภท

2.6.3. ตัวอย่างสำหรับการหว่านจะดำเนินการโดยวิธีน้ำหนักหรือปริมาตรทันทีหลังจากเปิดตัวอย่างผลิตภัณฑ์ การเปิดจะดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่ไม่รวมการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์โดยจุลินทรีย์ในบริเวณใกล้เคียงกับเปลวไฟของหัวเผาด้วยเครื่องมือที่ปราศจากเชื้อ

2.6.4. มีการเลือกตัวอย่างผลิตภัณฑ์เพื่อให้มีส่วนประกอบทั้งหมดและมีอัตราส่วนเดียวกันกับตัวอย่างที่วิเคราะห์

2.6.5. ในการเตรียมการเจือจางตัวอย่างผลิตภัณฑ์จะใช้สารละลายเกลือเปปโตน

อนุญาตให้เตรียมการเจือจางเริ่มต้นของผลิตภัณฑ์ที่มี NaCl มากกว่า 5% โดยใช้น้ำเปปโตน การเจือจางครั้งแรกของเนื้อสัตว์ ปลา และผลิตภัณฑ์นม - โดยใช้น้ำเกลือ

มวล (ปริมาตร) ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์สำหรับเตรียมการเจือจางเริ่มต้นหรือโฮโมจีเนตต้องมีอย่างน้อย (10 ± 0.1) g/cm 3 .

อัตราส่วนระหว่างมวล (ปริมาตร) ของตัวอย่างผลิตภัณฑ์กับปริมาตรของสารละลายเกลือเปปโตนสำหรับการเจือจางครั้งแรกและการเจือจางที่ตามมาคือ:

1:9 - สำหรับการเจือจาง 10 เท่า (สำหรับผลิตภัณฑ์ที่มีไขมันจำนวนมากโดยไม่มีสารลดแรงตึงผิว 1:10)

1:5 - สำหรับการเจือจาง 6 เท่า

1:3 - สำหรับการเจือจาง 4 เท่า

1:1 - สำหรับการเจือจาง 2 เท่า

หากจำเป็นต้องเจือจางตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่มีไขมันจำนวนมาก อนุญาตให้ใช้สารลดแรงตึงผิว (โซเดียมไบคาร์บอเนต ฯลฯ) ที่ไม่มีฤทธิ์ต้านจุลชีพได้

ในการเตรียมการเจือจางตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่มีแรงดันออสโมติกสูง อนุญาตให้ใช้เปปโทนหรือน้ำกลั่นได้

(ฉบับปรับปรุง ฉบับที่ ๑).

2.6.6. การเจือจางเริ่มต้นของตัวอย่างผลิตภัณฑ์จัดทำขึ้นภายใต้สภาวะปลอดเชื้อด้วยวิธีใดวิธีหนึ่งต่อไปนี้:

การละลายของผลิตภัณฑ์

การเจือจางของผลิตภัณฑ์ที่มีเฟสของเหลว

การแขวนลอยของแป้ง ผลิตภัณฑ์ที่เป็นแป้งเปียก และพื้นผิวของผลิตภัณฑ์ที่มีการปนเปื้อนของเชื้อจุลินทรีย์

การทำให้เป็นเนื้อเดียวกันของผลิตภัณฑ์ที่เป็นของแข็ง

ส่วนของผลิตภัณฑ์ที่เหลืออยู่บนพื้นผิวของปิเปตสามารถระบายออกที่ปลายปิเปตได้ การหยดที่เกิดขึ้นจะถูกลบออกโดยการแตะที่ผนังด้านในของจานหรือภาชนะสำหรับผู้บริโภคเหนือพื้นผิวของผลิตภัณฑ์

ผลิตภัณฑ์ที่มีความหนืดจะถูกขจัดออกจากพื้นผิวของปิเปตด้วยไม้กวาดที่ปราศจากเชื้อ

ส่วนหนึ่งของผลิตภัณฑ์จะถูกถ่ายโอนไปยังภาชนะที่มีสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือเพื่อเตรียมการเจือจางเบื้องต้น เพื่อไม่ให้ปิเปตสัมผัสกับพื้นผิวของสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือ ใช้ปิเปตที่ปราศจากเชื้ออีกอันหนึ่ง ผสมผลิตภัณฑ์กับสารละลายเกลือเปปโตนให้ทั่วถึงโดยเติมและขับออกของส่วนผสมเป็นสิบเท่า

เมื่อทำงานกับผลิตภัณฑ์ที่มีความหนืด ขอแนะนำให้วางลูกบอลแก้วหลายลูกในภาชนะเพื่อให้ผสมกับสารละลายเกลือเปปโตนได้เร็วขึ้น

2.6.8. ผลิตภัณฑ์ของเหลวที่อิ่มตัวด้วยคาร์บอนไดออกไซด์ (CO 2 ) จะถูกถ่ายโอนไปยังขวดทรงกรวยหรือภาชนะอื่นที่ปราศจากเชื้อและถูกทำให้ร้อนด้วยการกวนเป็นวงกลมบ่อยครั้งในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 30 ถึง 37 ° C จนกระทั่งไม่มีอีกต่อไป จะมีฟองแก๊สออกมา

มีการนำตัวอย่างผลิตภัณฑ์มาประมวลผลตามหน้า

ตัวอย่างจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์ของแข็งที่ไม่ละลายน้ำจะถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในกรณีที่ระบุไว้ในเอกสารกำกับดูแลและทางเทคนิค เมื่อทำให้ผลิตภัณฑ์เป็นเนื้อเดียวกันจำนวนรอบทั้งหมดของ Homogenizer ควรเป็น 15 - 20,000 จำนวนรอบของ Homogenizer ไม่ควรน้อยกว่า 8,000 และมากกว่า 45,000 รอบต่อนาที

หากได้รับมวลที่ต่างกันในระหว่างการทำให้เป็นเนื้อเดียวกันของผลิตภัณฑ์ จะถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันเป็นเวลา 15 นาที และของเหลวส่วนเกินจะถูกใช้สำหรับการเพาะเชื้อและ (หรือ) การเตรียมการเจือจาง

อนุญาตให้ทำให้ผลิตภัณฑ์ที่ไม่ผ่านการฆ่าเชื้อเป็นเนื้อเดียวกันได้โดยการบดจนเป็นเนื้อเดียวกันในมอร์ตาร์ปลอดเชื้อภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ

(ฉบับปรับปรุง ฉบับที่ ๑).

2.6.12. ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่เป็นแป้งจะถูกนำมาหลังจากผสมอย่างละเอียดด้วยช้อนหรือแท่งแก้วแล้วดำเนินการตามหน้า

2.6.13. ตัวอย่างไขมันเหลวจะถูกเก็บด้วยปิเปตอุ่นๆ ที่ให้ความร้อนด้วยการเผา หลังจากเติมผลิตภัณฑ์ลงในปิเปตแล้ว ส่วนที่เหลือจะถูกลบออกจากพื้นผิวของปิเปตด้วยไม้กวาดที่ปราศจากเชื้อ

ผลิตภัณฑ์จากปิเปตถูกนำเข้าสู่จานที่มีจุกแก้วและเจือจางด้วยสารละลายเกลือเปปโตนในปริมาณที่ต้องการซึ่งให้ความร้อนถึง 40-45 ° C เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์ไซโครฟิลิก อุณหภูมิไม่ควรเกิน 37 °C คราบไขมันที่เกาะอยู่บนปิเปตจะถูกล้างด้วยสารละลายเกลือเปปโตน ซึ่งจะถูกดูดหลายครั้งและปล่อยออกจากปิเปต

2.6.14. ตัวอย่างไขมันแข็งจะถูกนำมาหลังจากตัดผลิตภัณฑ์ด้วยมีดหรือลวดออกเป็นหลายส่วน หากจำเป็น ให้ถอดชั้นบนสุดออก

ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ถูกนำมาจากพื้นผิวของการตัดจากสถานที่ต่าง ๆ ด้วยมีดผ่าตัดและถ่ายโอนไปยังจานชั่งที่มีฝาปิด

ตัวอย่างจำนวนหนึ่งจะถูกส่งไปยังจานปากกว้างที่มีจุกแก้วแบบกราวด์ ส่วนที่เหลือของไขมันที่เกาะติดกับผนังของจานจะถูกล้างในจานเดียวกันด้วยสารละลายเกลือเปปโตนจำนวนหนึ่งที่อุ่นถึง 40 - 45 ° C ซึ่งจะถูกเพิ่มเข้าไปในจานในปริมาณที่จำเป็นเพื่อให้ได้การเจือจางเริ่มต้น

จากไขมันแข็ง สามารถเลือกตัวอย่างได้ตามปริมาตร ไขมันละลายในจานคอกว้างในอ่างน้ำที่อุณหภูมิไม่เกิน 45 องศาเซลเซียส เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์ไซโครฟิลิก อุณหภูมิไม่ควรเกิน 37 °C

หลังจากผสมไขมันที่ละลายแล้ว ปิเปตอุ่นจะถูกถ่ายโอนไปยังจานปากกว้างที่มีฝาแก้วบดซึ่งมีสารละลายเกลือเปปโตนในปริมาณที่ต้องการเพื่อเตรียมการเจือจางเบื้องต้น สารละลายเกลือเปปโตนอุ่นที่อุณหภูมิ 40 - 45 °C; เมื่อตรวจพบจุลินทรีย์ที่ออกฤทธิ์ต่อจิตถึง 37 °C

2.6.15 ตัวอย่างจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์วิปปิ้งหรือเนื้อเหลวที่มีไขมันจำนวนมากหลังจากผสมกับแท่งแก้วแล้วให้นำช้อนใส่จานชั่งและสารละลายเกลือเปปโตนอุ่นที่อุณหภูมิ 40 - 45 ° C จะถูกเพิ่มในปริมาณที่จำเป็นเพื่อเตรียมการเจือจางเริ่มต้น

2.6.16 การตรวจสอบการปนเปื้อนของเชื้อจุลินทรีย์ที่พื้นผิวของตัวอย่างผลิตภัณฑ์ดำเนินการโดยการล้างด้วยก้านสำลี

สำลีปลอดเชื้อชุบสารละลายเกลือเปปโตนแล้วเช็ดในจุดต่างๆ บนพื้นผิวของชิ้นส่วนต่างๆ ของผลิตภัณฑ์ที่วิเคราะห์ด้วยพื้นที่รวม 100 ซม. 2 .

พื้นที่ผิวที่จะวิเคราะห์วัดโดยใช้แม่แบบปลอดเชื้อที่มีรูขนาดเหมาะสม

ไม้กวาดวางอยู่ในหลอดทดลองที่มีสารละลายเกลือเพปโทน 10 ซม. 3 เนื้อหาของหลอดผสมกับปิเปตอย่างละเอียด การระงับที่เกิดขึ้นถือเป็นการเจือจางเดิม

(ฉบับปรับปรุง ฉบับที่ ๑).

2.7. การเตรียมการเจือจางสิบเท่า

2.7.1. การเจือจางตัวอย่างแรกเป็นสิบเท่าเป็นการเจือจางเริ่มต้น การเจือจางเริ่มต้นจะถูกเตรียมตามหน้า จะได้รับการเจือจางในภายหลัง

2.7.2. การเจือจางครั้งที่สองที่ตามมาเตรียมจากส่วนหนึ่งของการเจือจางดั้งเดิมและสารละลายเปปโตน-น้ำเกลือเก้าส่วนโดยผสมในหลอดทดลอง

หากใช้ปิเปตเพื่อผสมการเจือจางเริ่มต้น ปิเปตเดียวกันจะถูกใช้เพื่อเติมการเจือจางเริ่มต้น 1 ซม. 3 ลงในสารละลายเกลือเปปโตน 9 ซม. 3 โดยไม่ต้องสัมผัสพื้นผิวของสารละลายด้วยปิเปต การเจือจางผสมกับปิเปตอื่นโดยการดูดและเป่าเนื้อหาของหลอดสิบครั้ง

2.7.3. การเจือจางครั้งที่สามและครั้งต่อ ๆ ไปจัดทำในลักษณะเดียวกัน

2.7.4. ช่วงเวลาระหว่างการเตรียมส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์ การเจือจาง และการหว่านในอาหารเลี้ยงเชื้อไม่ควรเกิน 30 นาที

ภาคผนวก 1
อ้างอิง

คำที่ใช้ในมาตรฐานและคำอธิบาย

(ฉบับปรับปรุง ฉบับที่ ๑).

ภาคผนวก 2
อ้างอิง

ข้อบกพร่องกระป๋อง

ข้อบกพร่องในผลิตภัณฑ์กระป๋องคือ:

มองเห็นได้ด้วยตาเปล่า สัญญาณของการพัฒนาของจุลินทรีย์: การหมัก, รา, เมือก, ฯลฯ ;

ตะกอนที่ด้านล่างของกระป๋องหรือที่ขอบของพื้นผิวของผลิตภัณฑ์พร้อมกับภาชนะ (“วงแหวน”)

ความขุ่นของเฟสของเหลว

การแข็งตัว;

เปรี้ยว;

ภายนอก ไม่ใช่ลักษณะของผลิตภัณฑ์ กลิ่น และ (หรือ) รส;

เปลี่ยนสี

ข้อบกพร่องในลักษณะที่ปรากฏของภาชนะบรรจุที่มีผลิตภัณฑ์บรรจุอยู่จะพิจารณา:

สัญญาณการรั่วไหลที่มองเห็นได้ด้วยตาเปล่า: รู รอยร้าว รอยเปื้อน หรือร่องรอยของผลิตภัณฑ์ที่ไหลออกจากกระป๋อง

กระป๋องที่มีปลายสั่น

ตะเข็บกระป๋องที่ออกแบบไม่ถูกต้อง (ลิ้น, ฟัน, การตัดราคา, ตะเข็บปลอม, ตะเข็บม้วน);

สนิมหลังจากกำจัดเปลือกที่เหลืออยู่

ความผิดปกติของร่างกาย, ปลายหรือตะเข็บตามยาวของกระป๋องในรูปแบบของขอบคมและ "นก";

ฝาเอียงบนขวดแก้ว, รอยย่นของฝาปิดตามสนามที่ม้วน, วงแหวนยางที่ยื่นออกมา (“ ห่วง”);

รอยแตกหรือแก้วบิ่นที่รอยต่อ, ฝาไม่พอดีเมื่อเทียบกับคอกระป๋อง;

การเสียรูป (การเยื้อง) ของฝาขวดแก้วซึ่งทำให้เกิดการละเมิดรอยต่อรอยต่อ

เมมเบรนยืดหยุ่นนูน (ปุ่ม) บนฝาครอบ

ภาคผนวก 3
อ้างอิง

การเตรียมมวย

อาหารกระป๋องถูกเปิดในห้องกล่องที่ดัดแปลงเป็นพิเศษสำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา ในกล่อง ไม่ควรมีพื้นผิวที่ไม่สามารถเข้าถึงได้สำหรับการฆ่าเชื้อโรคแบบเปียก และควรไม่รวมการเคลื่อนตัวของอากาศที่เกิดจากกระแสลม ผนัง พื้น และเพดานต้องบุด้วยวัสดุหรือทาสีด้วยน้ำยาฆ่าเชื้อที่ทนทานต่อการบำบัดแบบเปียก สำหรับการฆ่าเชื้อในอากาศกล่องจะติดตั้งหลอดอัลตราไวโอเลตในอัตรา 1.5 - 2.5 W ต่อ 1 ม. 3

มีเพียงนักจุลชีววิทยาเท่านั้นที่ทำการวิเคราะห์ และถ้าจำเป็น ควรมีผู้ช่วยอยู่ในกล่อง

กล่องต้องมีโต๊ะและสตูล ไม่ควรมีรายการพิเศษ ยกเว้นรายการที่จำเป็นสำหรับการวิเคราะห์อาหารกระป๋อง

บนโต๊ะควรเป็น:

เตาวิญญาณหรือเตาแก๊ส

ขวดที่มีจุกกราวด์พร้อมแอลกอฮอล์

ขวดโหลปิดฝาด้วยสำลีปลอดเชื้อหนาแน่นที่เตรียมไว้ล่วงหน้าขนาด 3 ´ 3 ซม. หรือห่วงสำลี

ขวดที่มีน้ำยาฆ่าเชื้อ (ชั้นสูง 3 ซม.) สำหรับวางปิเปตหรือหลอดที่ใช้หลังการวิเคราะห์

โลหะขนาดเล็กหรือถาดเคลือบซึ่งวางกระป๋องที่วิเคราะห์ไว้

ปิเปตหรือหลอดที่ปราศจากเชื้อที่ใช้เก็บตัวอย่าง

ควรเก็บอุปกรณ์เสริมไว้ในลิ้นชักของโต๊ะ: แหนบและที่เจาะ หมัดควรมีรูปร่างเป็นหอกที่มีหน้าตัดเป็นรูปสี่เหลี่ยมขนมเปียกปูนที่มีเส้นทแยงมุม 1 ´ 1.5 ซม. หรือมีหน้าตัดเป็นรูปสามเหลี่ยมหน้าจั่ว

เมื่อเปิดกระป๋องจำนวนมาก จะใช้หมัดที่ติดตั้งบนขาตั้ง ในกรณีนี้การเปิดทำได้โดยการกดคันโยกบนฝาขวด

ก่อนเปิดขวด หมัดจะลุกเป็นไฟด้วยไม้กวาด

กล่องจะถูกล้างและฆ่าเชื้อทันทีก่อนการวิเคราะห์ (ไม่เร็วกว่า 24 ชั่วโมงก่อนเริ่ม) และหลังจากเสร็จสิ้น การฆ่าเชื้อทำได้โดยการเช็ดพื้นผิวทั้งหมดด้วยคลอรีนหรือสารฆ่าเชื้ออื่น ๆ ตามคำแนะนำที่เกี่ยวข้องกับการเตรียมการแต่ละครั้ง 45 นาทีก่อนเริ่มงานในกล่องไฟฆ่าเชื้อแบคทีเรียจะเปิดเป็นเวลา (30 ± 5) นาที

ในปัจจุบัน ตู้กรองแบบลามินาร์โฟลว์ (ตู้ป้องกันอากาศบริสุทธิ์พิเศษ) ใช้สำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา กล่องลามิเนตผลิตโดยโรงงาน Uzhgorod ของอุปกรณ์ทางการแพทย์ "Laminar" กล่องของแบรนด์ BPV 1200 ผลิตในฮังการี กล่องของแบรนด์ TVG-S II 1.14.1 ผลิตโดย Babcock - BSH (เยอรมนี)

ภาคผนวก 2, 3. (แนะนำเพิ่มเติม แก้ไขครั้งที่ 1)

ข้อมูลสารสนเทศ

1. พัฒนาและแนะนำโดยคณะกรรมการอุตสาหกรรมเกษตรแห่งรัฐของสหภาพโซเวียต

2. ได้รับการอนุมัติและแนะนำโดยกฤษฎีกาของคณะกรรมการมาตรฐานของสหภาพโซเวียตหมายเลข 3810 ลงวันที่ 04.12.85

3. มาตรฐานเป็นไปตาม ST SEV 3014-81 อย่างสมบูรณ์

4. มาตรฐานสากลถูกนำมาใช้ในมาตรฐาน: ISO 6887-83 (E) และ ISO 7218-85

5. แทนที่ GOST 10444.0-75

6. ข้อบังคับอ้างอิงและเอกสารทางเทคนิค