09.06.2017
हम सभी गर्मियों का इंतजार करते हैं; दुर्भाग्य से, इस समय के दौरान खाद्य विषाक्तता का खतरा काफी बढ़ जाता है, क्योंकि गर्मी खतरनाक सूक्ष्मजीवों के प्रसार के लिए अनुकूल परिस्थितियाँ बनाती है, और भोजन उनके लिए एक उत्कृष्ट वातावरण के रूप में कार्य करता है। खाद्य भंडारण उल्लंघन के संकेतकों में से एक QMAFAnM है।
KMAFAnM - मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक की संख्या अवायवीय सूक्ष्मजीवया सामान्य जीवाणु संदूषण। यह एक मानदंड है जो आपको 48-72 घंटों के लिए 30 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर कुछ मीडिया पर बढ़ने वाले सूक्ष्मजीवों के सभी समूहों की पहचान करने की अनुमति देता है। ये सूक्ष्मजीव हमेशा और हर जगह (पानी, हवा, उपकरण की सतह) मौजूद होते हैं।
यह संकेतक किसी उत्पाद में सूक्ष्मजीवों की कुल सामग्री को दर्शाता है और उत्पादों की गुणवत्ता का आकलन करने के लिए हर जगह उपयोग किया जाता है, सिवाय इसके कि जिनके उत्पादन में विशेष माइक्रोबियल संस्कृतियों का उपयोग किया जाता है (उदाहरण के लिए, बीयर, क्वास, डेयरी उत्पादोंऔर इसी तरह।)। सभी तकनीकी चरणों में इसका नियंत्रण यह निगरानी करना संभव बनाता है कि कच्चा माल उत्पादन में कितना "साफ" हो रहा है, गर्मी उपचार के बाद इसकी "शुद्धता" की डिग्री कैसे बदलती है, और क्या उत्पाद गर्मी उपचार के बाद, पैकेजिंग के दौरान पुन: संदूषित होता है या नहीं। भंडारण।
QMAFAnM संकेतक का मूल्य कई कारकों पर निर्भर करता है। सबसे महत्वपूर्ण - मोड उष्मा उपचारउत्पाद, उसके परिवहन, भंडारण और बिक्री के दौरान तापमान की स्थिति, उत्पाद की आर्द्रता और सापेक्ष वायु आर्द्रता, ऑक्सीजन की उपस्थिति, उत्पाद की अम्लता, आदि।
QMAFAnM में वृद्धि सूक्ष्मजीवों के प्रसार को इंगित करती है, जिसमें रोगजनक और सूक्ष्मजीव शामिल हो सकते हैं जो उत्पाद खराब होने का कारण बनते हैं (उदाहरण के लिए, मोल्ड); एक बड़ी संख्या की QMAFAnM अक्सर उल्लंघन का संकेत देता है स्वच्छता नियमऔर उत्पादन का तकनीकी तरीका, साथ ही समय और तापमान की स्थितिभंडारण, परिवहन और बिक्री खाद्य उत्पाद.
अपनी और अपने प्रियजनों की सुरक्षा कैसे करें?
तथाकथित स्वतःस्फूर्त बाजारों में, सड़क पर हाथ से खाना खरीदना बहुत खतरनाक है। हमारे पसंदीदा तैयार सलाद, जिसमें सॉसेज, मशरूम, पनीर और अंडे होते हैं, बहुत जल्दी खराब हो जाते हैं। रेफ्रिजरेटर के बाहर आधे घंटे से भी कम समय ऐसे उत्पाद को खट्टा बनाने और जीवन के लिए खतरा बनने के लिए पर्याप्त है। पनीर, केफिर, दही, खट्टा क्रीम और अन्य डेयरी उत्पाद विशेष रूप से गर्म मौसम में जल्दी खराब हो जाते हैं।
यह न केवल रिलीज की तारीख, बल्कि पैकेजिंग की जकड़न की भी जांच करने लायक है। इसलिए, बड़े शहर के बाज़ारों का दौरा करें जो विशेष रूप से व्यापार के लिए सुसज्जित हैं। में बिक्री केन्द्ररेफ्रिजरेटर हो ही, यह असंभव है विकारी खाद्य पदार्थकाउंटर पर लेट जाओ. सभी उत्पादों के लिए, विक्रेता को गुणवत्ता प्रमाणपत्र, पशु चिकित्सा प्रमाणपत्र और रिपोर्ट, साथ ही अपनी स्वयं की मेडिकल बुक भी प्रदान करनी होगी।
दुर्भाग्य से, उन सभी मामलों की भविष्यवाणी करना मुश्किल है जहां आपको कम गुणवत्ता वाला उत्पाद बेचा जाएगा, लेकिन यदि आप गंभीरता से लेते हैं कि हम क्या खाते हैं, तो वास्तव में अधिकांश समस्याओं से बचा जा सकता है।
इसलिए निष्कर्ष - आपको खाद्य पदार्थों को सही ढंग से चुनने, संग्रहीत करने और उपभोग करने में सक्षम होने की आवश्यकता है!
डिप्टी पशु चिकित्सा एवं जोखिम विश्लेषण विभाग के प्रमुख खाद्य उत्पादएफएसबीआई "रोसेलखोज़्नादज़ोर का रोस्तोव संदर्भ केंद्र" ऐलेना प्रोकोपोवा
इसी तरह के प्रकाशन: "पशु चिकित्सा विभाग और खाद्य उत्पादन का जोखिम विश्लेषण", "सुरक्षित सर्दी वाणिज्यिक मछली के स्वास्थ्य की कुंजी है", "डॉन पर जीवित वाणिज्यिक मछली का उत्पादन दोगुना हो गया है"
2013 की वर्तमान अवधि के दौरान, संघीय राज्य बजटीय संस्थान के परीक्षण केंद्र "रोसेलखोज्नदज़ोर के रोस्तोव संदर्भ केंद्र" के विशेषज्ञों ने पशु मूल के उत्पादों के 98 नमूनों में QMAFAnM के अधिक मूल्य की पुष्टि की।
KMAFAnM - मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों या कुल जीवाणु संदूषण की संख्या। यह एक मानदंड है जो आपको 48-72 घंटों के लिए 30 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर कुछ मीडिया पर बढ़ने वाले सूक्ष्मजीवों के सभी समूहों की पहचान करने की अनुमति देता है। ये सूक्ष्मजीव हमेशा और हर जगह (पानी, हवा, उपकरण की सतह) मौजूद होते हैं।
यह संकेतक किसी उत्पाद में सूक्ष्मजीवों की कुल सामग्री को दर्शाता है और उत्पादों की गुणवत्ता का आकलन करने के लिए हर जगह उपयोग किया जाता है, सिवाय इसके कि जिनके उत्पादन में विशेष माइक्रोबियल संस्कृतियों का उपयोग किया जाता है (उदाहरण के लिए, बीयर, क्वास, किण्वित दूध उत्पाद, आदि) .). सभी तकनीकी चरणों में इसका नियंत्रण यह निगरानी करना संभव बनाता है कि कच्चे माल को उत्पादन में कैसे "स्वच्छ" आपूर्ति की जाती है, गर्मी उपचार के बाद इसकी "शुद्धता" की डिग्री कैसे बदलती है, और पैकेजिंग के दौरान गर्मी उपचार के बाद उत्पाद पुन: संदूषण से गुजरता है या नहीं और भंडारण.
QMAFAnM संकेतक का मूल्य कई कारकों पर निर्भर करता है। सबसे महत्वपूर्ण हैं उत्पाद की ताप उपचार व्यवस्था, उसके परिवहन, भंडारण और बिक्री के दौरान तापमान व्यवस्था, उत्पाद की आर्द्रता और सापेक्ष वायु आर्द्रता, ऑक्सीजन की उपस्थिति, उत्पाद की अम्लता आदि। QMAFAnM में वृद्धि सूक्ष्मजीवों के प्रसार को इंगित करती है, जिसमें रोगजनक और सूक्ष्मजीव शामिल हो सकते हैं जो उत्पाद खराब होने का कारण बनते हैं (उदाहरण के लिए, मोल्ड); QMAFAnM की एक बड़ी संख्या अक्सर स्वच्छता नियमों और तकनीकी विनिर्माण स्थितियों के उल्लंघन के साथ-साथ खाद्य उत्पादों के भंडारण, परिवहन और बिक्री के समय और तापमान की स्थिति का संकेत देती है।
उपभोक्ता के लिए, QMAFAnM संकेतक खाद्य उत्पादों की गुणवत्ता, ताजगी और सुरक्षा की विशेषता बताता है। वहीं, केवल इस सूचक द्वारा किसी उत्पाद की गुणवत्ता का आकलन करने के कई नुकसान हैं। सबसे पहले, यह सूक्ष्मजीवों का केवल एक सामान्य, मात्रात्मक मूल्यांकन है, क्योंकि अध्ययन रोगजनक, सशर्त रूप से रोगजनक, साइकोफिलिक और थर्मोफिलिक सूक्ष्मजीवों को ध्यान में नहीं रखता है। दूसरे, यह विधि तकनीकी और विशिष्ट माइक्रोफ्लोरा वाले उत्पादों के लिए अस्वीकार्य है।
उच्च सामग्रीभोजन में QMAFAnM का कारण हो सकता है विषाक्त भोजनदस्त, आंत्रशोथ के लक्षणों के साथ। छोटे बच्चे, बुजुर्ग और कमजोर लोग इस बीमारी के प्रति सबसे अधिक संवेदनशील होते हैं।
अपनी और अपने प्रियजनों की सुरक्षा कैसे करें?
तथाकथित स्वतःस्फूर्त बाजारों में, सड़क पर हाथ से खाना खरीदना बहुत खतरनाक है। हमारे पसंदीदा तैयार सलाद, जिनमें सॉसेज, मशरूम, पनीर और अंडे होते हैं, बहुत जल्दी खराब हो जाते हैं। रेफ्रिजरेटर के बाहर आधे घंटे से भी कम समय ऐसे उत्पाद को खट्टा बनाने और जीवन के लिए खतरा बनने के लिए पर्याप्त है। पनीर, केफिर, दही, खट्टा क्रीम और अन्य डेयरी उत्पाद विशेष रूप से गर्म मौसम में जल्दी खराब हो जाते हैं। यह न केवल रिलीज की तारीख, बल्कि पैकेजिंग की जकड़न की भी जांच करने लायक है। इसलिए, बड़े शहर के बाज़ारों का दौरा करें जो विशेष रूप से व्यापार के लिए सुसज्जित हैं। रिटेल आउटलेट में एक रेफ्रिजरेटर होना चाहिए; खराब होने वाले सामान को काउंटर पर नहीं छोड़ा जा सकता है। सभी उत्पादों के लिए, विक्रेता को गुणवत्ता प्रमाणपत्र, पशु चिकित्सा प्रमाणपत्र और रिपोर्ट, साथ ही अपनी स्वयं की मेडिकल बुक भी प्रदान करनी होगी। बड़े स्टोर से किराने का सामान खरीदें। उनमें, उत्पाद की गुणवत्ता की हर घंटे जाँच की जाती है; प्रबंधक और स्टोर प्रबंधक आने वाले सामान के प्रत्येक बैच की जाँच करते हैं।
दुर्भाग्य से, उन सभी मामलों की भविष्यवाणी करना मुश्किल है जहां आपको कम गुणवत्ता वाला उत्पाद बेचा जाएगा, लेकिन यदि आप गंभीरता से लेते हैं कि हम क्या खाते हैं, तो वास्तव में अधिकांश समस्याओं से बचा जा सकता है।
इसलिए निष्कर्ष - आपको खाद्य पदार्थों को सही ढंग से चुनने, संग्रहीत करने और उपभोग करने में सक्षम होने की आवश्यकता है!
दूध और डेयरी उत्पाद पशु मूल के मूल्यवान खाद्य उत्पाद हैं। हालाँकि, यह याद रखना चाहिए कि बीमार जानवरों से प्राप्त दूध मनुष्यों में ज़ूनथ्रोपोनोटिक (मनुष्यों और जानवरों के लिए आम) बीमारियों से संक्रमण का एक स्रोत हो सकता है, इसके अलावा, यदि स्वच्छता नियमों और प्राप्त करने, प्रसंस्करण और भंडारण के लिए प्रौद्योगिकी का उल्लंघन किया जाता है, तो दूध इसका कारण बन सकता है। खाद्य विषाक्तता और विषाक्त संक्रमण।
सूक्ष्मजीवों द्वारा डेयरी उत्पादों के प्राथमिक संदूषण का स्रोत कच्चा दूध है। सूक्ष्मजीव बाहरी वातावरण से उत्सर्जन नलिकाओं, दूध टैंक और निपल नहर के माध्यम से दूध में प्रवेश करते हैं। दूध के गैर-विशिष्ट माइक्रोफ्लोरा में बैक्टीरिया, यीस्ट और मोल्ड कवक होते हैं। सूक्ष्मजीवों के साथ दूध का संदूषण दूध देने की प्रक्रिया के दौरान पहले से ही होता है और इसकी तीव्रता फार्म पर स्वच्छता के स्तर, दूध देने वाले उपकरणों की धुलाई और कीटाणुशोधन की गुणवत्ता पर निर्भर करती है। सतह पर सूक्ष्म जीव बड़ी संख्या में पाए जाते हैं त्वचाजानवर। सूक्ष्मजीव भोजन, बिस्तर, खाद और हवा से त्वचा की सतह पर आते हैं।
दूध के लिए खराब भंडारण की स्थिति भी इसमें माइक्रोफ्लोरा के विकास में योगदान करती है। ताजा दूध निकाला हुआ, ताजा दूध जीवाणुनाशक होता है, अर्थात। दूध में प्रवेश करने वाले जीवाणुओं के प्रसार में देरी करने और यहां तक कि उन्हें मारने की क्षमता। जीवाणुनाशक गुणों को बनाए रखने के लिए ताजा दूध, इसे ठंडा किया जाता है। +30°C के तापमान पर, जीवाणुनाशक गतिविधि 3 घंटे तक, +15°C पर - लगभग 8 घंटे, +10°C पर - लगभग 24 घंटे तक बनी रहती है। दूध निकालने के तुरंत बाद दूध को ठंडा किया जाता है और भेजे जाने तक +2 से +6°C के तापमान पर संग्रहित किया जाता है। भंडारण के दौरान, दूध के रोगाणुरोधी गुण गायब हो जाते हैं, और यदि भंडारण नियमों का पालन नहीं किया जाता है, तो अवांछित माइक्रोफ्लोरा के विकास के लिए स्थितियां बन जाती हैं, जिसके परिणामस्वरूप उत्पाद खराब हो जाता है।
रोगजनक सूक्ष्मजीव पर्यावरण से उत्पादन और परिवहन के दौरान दूध में प्रवेश कर सकते हैं या बीमार जानवरों के दूध में समाहित हो सकते हैं। मास्टिटिस वाले जानवरों के दूध में विशेष रूप से कई अलग-अलग रोगाणु होते हैं (स्टैफिलोकोकी, स्ट्रेप्टोकोकी, आदि)। सूक्ष्मजीव हवा के माध्यम से और तपेदिक, साल्मोनेलोसिस आदि से पीड़ित जानवरों के संपर्क के माध्यम से दूध में प्रवेश कर सकते हैं। और इसलिए, प्रोटीन, वसा और अम्लता के साथ, जीवाणु सामग्री (या QMAFAnM) दूध की गुणवत्ता और सुरक्षा के सबसे महत्वपूर्ण संकेतकों में से एक है।
तदनुसार, अच्छे दूध में बैक्टीरिया की मात्रा कम होती है। हालाँकि, हमें यह याद रखना चाहिए कि कच्चे दूध में शून्य जीवाणु संदूषण नहीं हो सकता है। दूध एक जीवित उत्पाद है जो जानवरों से प्राप्त होता है, और बैक्टीरिया किसी भी जीवित जीव के अभिन्न साथी हैं, और परिणामस्वरूप, इसकी महत्वपूर्ण गतिविधि के उत्पाद हैं। दूध में बड़ी संख्या में बैक्टीरिया होते हैं, यहां तक कि गैर-रोगजनक भी जो ऑर्गेनोलेप्टिक विशेषताओं को नहीं बदलते हैं, उन्हें पूर्ण नहीं माना जा सकता है। उत्पाद का बढ़ा हुआ जीवाणु संदूषण सूक्ष्मजीवों के प्रसार को इंगित करता है, जिसमें रोगजनक भी शामिल हो सकते हैं जो उत्पाद को खराब कर देते हैं। सूक्ष्मजीवों का उच्च स्तर दस्त और गैस्ट्रोएंटेराइटिस के लक्षणों के साथ खाद्य विषाक्तता का कारण भी बन सकता है।
जीवाणु संदूषण के संबंध में कच्चे दूध की आवश्यकताएं रूसी संघ के नियामक दस्तावेजों और तकनीकी विनियमों द्वारा स्थापित की जाती हैं सीमा शुल्क संघ. दूध में बैक्टीरिया की मात्रा - 1 सेमी³ में बैक्टीरिया की मात्रात्मक सामग्री कच्ची दूध. टीएमसी (कुल माइक्रोबियल संख्या) या QMAFAnM (मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या) के अनुसार दूध के सूक्ष्मजीवविज्ञानी संकेतक को सीमा शुल्क संघ के तकनीकी विनियमों की आवश्यकताओं का पालन करना चाहिए "दूध और डेयरी उत्पादों की सुरक्षा पर" (टीआर) सीयू 033/2013) दिनांक 10/09/2013 और 5.0×10 5 (500000) सीएफयू/सेमी³ से अधिक नहीं होना चाहिए।
तैयार दूध का जीवाणु संदूषण रिडक्टेस परीक्षण का उपयोग करके निर्धारित किया जाता है। यह विधि इस तथ्य पर आधारित है कि दूध के माइक्रोफ्लोरा द्वारा स्रावित रिडक्टेस एंजाइम मेथिलीन को रंगहीन कर देता है। नीले रंग की डाई. माइक्रोफ्लोरा की मात्रा और दूध के मलिनकिरण की दर के बीच एक संबंध स्थापित किया गया है जिसमें मेथिलीन नीला मिलाया गया है। मलिनकिरण की दर जितनी अधिक होगी, दूध में मौजूद सूक्ष्मजीवों की संख्या उतनी ही अधिक होगी और इसलिए, इसकी गुणवत्ता उतनी ही खराब होगी।
GOST 32901-2014 के अनुसार परीक्षण प्रयोगशालाओं में “दूध और डेयरी उत्पाद। तरीकों सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण", कच्चे दूध के जीवाणु संदूषण को निर्धारित करने के लिए, एक मध्यस्थता विधि के रूप में, एक ठोस पोषक माध्यम पर मूल दूध के कुछ तनुकरणों को टीका लगाने के लिए एक मानक प्लेट विधि का उपयोग किया जाता है, इसके बाद 30±1°C पर 72 घंटे तक खेती की जाती है और गिनती की जाती है मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक - अवायवीय सूक्ष्मजीवों (KMAFAnM) की कॉलोनी बनाने वाली इकाइयाँ (CFU)।
इस प्रकार, दूध में QMAFAnM का निर्धारण उत्पाद की स्वच्छता और स्वच्छ स्थिति को इंगित करता है, माइक्रोफ्लोरा के साथ इसके संदूषण की डिग्री, हमें पशु के स्वास्थ्य की स्थिति, थन की स्थिति, धोने और कीटाणुशोधन की प्रभावशीलता का न्याय करने की अनुमति देती है। उपकरण का रखरखाव, स्वच्छता और स्वच्छ उत्पादन स्थितियों का अनुपालन और श्रमिकों की व्यक्तिगत स्वच्छता के नियम, भंडारण और परिवहन की स्थिति तैयार उत्पाद. इसलिए, यह सूचक तकनीकी रूप से उपयोगी माइक्रोफ्लोरा (स्टार्टर संस्कृतियों के माइक्रोफ्लोरा) का उपयोग करके उत्पादित उत्पादों के अपवाद के साथ सभी डेयरी उत्पादों के लिए मानकीकृत है।
दैहिक कोशिकाएं दूध के स्थायी घटक हैं और इनका प्रतिनिधित्व निम्न द्वारा किया जाता है: स्तन ग्रंथियों, एल्वियोली और छोटी दूध नलिकाओं की श्लेष्मा झिल्ली की उपकला कोशिकाएं, जो बड़ी गोल कोशिकाएं (आकार 12 से 100 माइक्रोन या अधिक) होती हैं जो आमतौर पर समूहों के रूप में होती हैं। या परतें, कम अक्सर एकल कोशिकाओं के रूप में; नष्ट संरचना के अनिश्चित रूप की पतित उपकला कोशिकाएं; रक्त के गठित तत्व: ल्यूकोसाइट्स (मुख्य रूप से लिम्फोसाइट्स, न्यूट्रोफिल, ईोसिनोफिल्स, आदि) और एरिथ्रोसाइट्स। यह ज्ञात है कि दूध के दूध में दैहिक कोशिकाएं (बैक्टीरिया के विपरीत) गुणा नहीं करती हैं।
प्रत्येक जानवर के दूध में दैहिक कोशिकाओं की रूपात्मक और साइटोलॉजिकल संरचना और मात्रात्मक सामग्री विभिन्न कारकों के आधार पर बहुत भिन्न होती है: पशु की उम्र (बड़ी संख्या वाली गायों की तुलना में पहले बछड़े के दूध में दैहिक कोशिकाएं कम होती हैं) स्तनपान की), स्तनपान अवधि (स्वस्थ गाय के दूध में)। न्यूनतम राशिदैहिक कोशिकाओं का 2-6 महीने तक अवलोकन किया जाता है। स्तनपान, और बढ़ा हुआ - कोलोस्ट्रम अवधि में, स्तनपान के अंत में और स्टार्ट-अप अवधि के दौरान), प्रजनन और व्यक्तिगत विशेषताएंपशु, साथ ही पशुओं के स्वास्थ्य की स्थिति (विशेषकर थन की स्थिति), भोजन का स्तर और तरीके, आदि।
दैहिक कोशिका सामग्री दूध की सुरक्षा का एक महत्वपूर्ण संकेतक है और प्रसंस्करण के लिए इसकी उपयुक्तता को इंगित करती है। दूध में बड़ी संख्या में दैहिक कोशिकाओं की उपस्थिति से इसके गुणवत्ता संकेतकों में गंभीर कमी आती है: जैविक उपयोगिता खो जाती है, प्रसंस्करण के दौरान तकनीकी गुण बिगड़ जाते हैं। इसके अलावा, दूध की अम्लता कम हो जाती है, और वसा, कैसिइन और लैक्टोज की हानि नोट की जाती है। दूध कम गर्मी प्रतिरोधी हो जाता है और खराब हो जाता है रानीट, उपयोगी का विकास लैक्टिक एसिड बैक्टीरिया. ऐसे दूध से बनाना असंभव है गुणवत्ता वाला उत्पाद(पनीर, पनीर, दही, केफिर, आदि)। दैहिक कोशिकाएं न केवल दूध की गुणवत्ता को प्रभावित करती हैं, बल्कि गायों की उत्पादकता को भी प्रभावित करती हैं।
1 जुलाई, 2017 से, कच्चे दूध में दैहिक कोशिकाओं की सामग्री 7.5 × 10 5 प्रति 1 सेमी3 से अधिक नहीं होनी चाहिए, जबकि कच्चे दूध के उत्पादन के लिए इरादा है शिशु भोजन, पनीर और निष्फल दूध - प्रति 1 सेमी 3 में 5 × 10 5 कोशिकाओं से अधिक नहीं।
यह बहुत महत्वपूर्ण है कि दूध में दैहिक कोशिकाओं की सामग्री आसानी से और शीघ्रता से निर्धारित की जा सके। तैयार कच्चे माल में मास्टिटिस दूध की अशुद्धियों का पता लगाने के लिए, दैहिक कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करने के आधार पर प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष तरीकों का उपयोग किया जाता है। दूध में दैहिक कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करने के अप्रत्यक्ष तरीकों में कई अभिकर्मकों के साथ बातचीत करके उनका पता लगाने के तरीके शामिल हैं। वर्तमान में, दूध में दैहिक कोशिकाओं की संख्या का निर्धारण GOST 23453-2014 "कच्चा दूध" द्वारा नियंत्रित किया जाता है। दैहिक कोशिकाओं के निर्धारण के तरीके" और "मास्टोप्रिम" जैसी नैदानिक दवाओं का उपयोग करके और एक विस्कोमीटर का उपयोग करके किया जाता है। मानक राज्य वैज्ञानिक संस्थान "वीएनआईआईएमएस रोसेलखोज़ाकाडेमी" द्वारा विकसित किया गया था।
यह विधि दैहिक कोशिकाओं की कोशिका झिल्ली पर सल्फानॉल (दवा "मास्टोप्रिम" में शामिल एक सर्फेक्टेंट) के प्रभाव पर आधारित है, जिससे इसकी अखंडता का उल्लंघन होता है और कोशिका सामग्री बाहरी वातावरण में जारी होती है। इस मामले में, चिपचिपाहट (स्थिरता) बदल जाती है, जिसे दृष्टिगत रूप से या विस्कोमीटर से रिकॉर्ड किया जाता है। विश्लेषण के लिए, पीएमके-1 प्लेटों का उपयोग किया जाता है, इसके बाद दृश्य मूल्यांकन या केशिका-प्रकार के विस्कोमीटर का उपयोग किया जाता है, जिसे कच्चे दूध में दैहिक कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करने के लिए डिवाइस निर्माता द्वारा कैलिब्रेट किया जाता है।
दृश्य मूल्यांकन बेहद सरल है, लेकिन दूध में दैहिक कोशिकाओं की संख्या के विशिष्ट डिजिटल संकेतक प्राप्त करना संभव नहीं बनाता है। पर दृश्य मूल्यांकनहम केवल अभिकर्मक निर्देशों के अनुसार सुरक्षा सीमाएं निर्धारित कर सकते हैं।
हमारी प्रयोगशाला में, दूध में दैहिक कोशिकाओं की सामग्री सोमाटोस-V.2K विस्कोमीटर का उपयोग करके निर्धारित की जाती है। निर्धारण प्रक्रिया इस प्रकार है: दवा "मास्टोप्रिम" के घोल का 5 मिलीलीटर और विश्लेषण किए गए कच्चे दूध का 10 मिलीलीटर पिपेट के साथ लिया जाता है और विस्कोमीटर फ्लास्क में जोड़ा जाता है। नमूना लेने से पहले, विश्लेषण किए जाने वाले कच्चे दूध को अच्छी तरह मिलाया जाना चाहिए और यदि आवश्यक हो, तो यांत्रिक अशुद्धियों को साफ किया जाना चाहिए। विस्कोमीटर फ्लास्क में दवा "मास्टोप्रिम" के घोल के साथ विश्लेषण किए गए कच्चे दूध के मिश्रण को मैन्युअल या स्वचालित मोड में (30±10) सेकंड के लिए हिलाया जाता है। मिश्रण के अंत में, विश्लेषण किए गए कच्चे दूध में दैहिक कोशिकाओं की संख्या उस समय से निर्धारित होती है जब मिश्रण केशिका से बाहर निकलता है। रिसाव की अवधि मास्टोप्रिम दवा के घोल के साथ कच्चे दूध के मिश्रण की चिपचिपाहट से निर्धारित होती है, जो इसमें दैहिक कोशिकाओं की प्रारंभिक सामग्री से संबंधित होती है। केशिका विस्कोमीटर का उपयोग करते समय दैहिक कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करने की सीमा कच्चे दूध के 1 सेमी3 में 90 से 1500 हजार तक होती है और केशिका से मिश्रण के प्रवाह की अवधि 12 से 58 सेकेंड तक होती है।
1 सेमी3 में 90 हजार से कम की विस्कोमीटर रीडिंग कच्चे दूध में हेराफेरी का संकेत देती है रसायन, और तापमान के संपर्क में आने से:
कच्चे दूध के कुछ संकेतकों को गलत साबित करने के लिए उपयोग किए जाने वाले हाइड्रोजन पेरोक्साइड, यूरिया, सोडा और अन्य पदार्थों को दूध में मिलाने से उनकी एकाग्रता के आधार पर विस्कोमीटर मूल्यों में सीधे आनुपातिक कमी आती है;
दूध को थर्माइज़ेशन या पास्चुरीकरण तापमान पर गर्म करने से डिवाइस की रीडिंग विफल हो जाती है, और विस्कोमीटर दूध के प्रति 1 सेमी3 में 90 हजार कोशिकाओं से कम का मान दिखाता है, चाहे उनकी वास्तविक सामग्री कुछ भी हो।
प्राप्त परिणामों का विश्लेषण करते समय इन विशेषताओं को ध्यान में रखा जाना चाहिए।
दैहिक कोशिकाओं की सामग्री थन के स्वास्थ्य का सबसे महत्वपूर्ण अप्रत्यक्ष संकेतक है, क्योंकि दूध में सूजन प्रक्रिया के दौरान रक्त कोशिकाओं की संख्या, विशेष रूप से ल्यूकोसाइट्स और न्यूट्रोफिल ग्रैन्यूलोसाइट्स में तेजी से वृद्धि होती है। सूजन संबंधी प्रक्रियाएं सबक्लिनिकल मास्टिटिस के विकास का कारण हैं। सबक्लिनिकल मास्टिटिस के साथ, थन में सूजन के कोई दृश्य लक्षण नहीं पाए जाते हैं, लेकिन दूध में दैहिक कोशिकाओं की मात्रा बढ़ जाती है। इस प्रकार, परिवर्तन होता है रासायनिक संरचनादूध अक्सर उसी मास्टिटिस की उपस्थिति का प्रमाण होता है। सबक्लिनिकल मास्टिटिस के सबसे आम प्रेरक एजेंट स्ट्रेप्टोकोकी और स्टेफिलोकोसी हैं। सबक्लिनिकल मास्टिटिस लंबे समय तक जारी रह सकता है, जिससे थन और फार्म दोनों के स्वास्थ्य को लगातार नुकसान होता है (उत्पादकता में कमी, दूध की कीमतों में कमी), और यह क्लिनिकल मास्टिटिस में भी विकसित हो सकता है।
ऐसे अन्य कारक भी हैं जो दूध में दैहिक कोशिकाओं की सामग्री को प्रभावित करते हैं, उदाहरण के लिए: दूध देने के दौरान त्रुटियां, दूध देने के उपकरण में दोष, अपर्याप्त स्वच्छता, रखरखाव त्रुटियां, भोजन त्रुटियां आदि।
अंत में, मैं कुछ आंकड़े प्रस्तुत करना चाहूंगा: इस वर्ष की शुरुआत से, क्षेत्र में पशु चिकित्सा प्रयोगशालाओं ने कच्चे के 1,500 से अधिक नमूनों की जांच की है गाय का दूधखेतों से, जिनमें से केवल 7 नमूनों को "QMAFAnM" और "दैहिक कोशिकाओं की सामग्री" संकेतकों के आधार पर अस्वीकार करना पड़ा। ये बोलता है अच्छी गुणवत्ताहमारे क्षेत्र में कृषि उत्पादकों द्वारा बेचा जाने वाला दूध।
यह आविष्कार सूक्ष्म जीव विज्ञान से संबंधित है, अर्थात् खाद्य संदूषण के निर्धारण से। विधि में मांस-पेप्टोन एगर तैयार करना, इसे पेट्री डिश में डालना, खाद्य उत्पादों से नमूने लेना, खाद्य उत्पादों के नमूने से एक निलंबन तैयार करना, परीक्षण निलंबन के दशमलव तनुकरण तैयार करना और पेट्री डिश में परीक्षण निलंबन के दशमलव तनुकरण को रखना शामिल है। सूत्र के अनुसार कालोनियों की संख्या बढ़ाना और गिनना: x=a n ×10, n - तनुकरण की डिग्री। इसके अलावा, परीक्षण निलंबन के दशमलव तनुकरण को तैयार करने के लिए, मांस-पेप्टोन अगर के 0.6-0.8% समाधान का उपयोग किया जाता है, जबकि परीक्षण निलंबन के दशमलव तनुकरण को पेट्री में मांस-पेप्टोन अगर की सतह पर स्थित झिल्ली फिल्टर पर रखा जाता है। व्यंजन। यह विधि समाधान में मौलिक है, लागू करने में आसान है, जानकारीपूर्ण है, और सांख्यिकीय रूप से विश्वसनीय परिणाम देती है; आपको संस्कृति मीडिया, बाँझ बैक्टीरियोलॉजिकल ग्लासवेयर और विश्लेषण समय की खपत को काफी कम करने की अनुमति देता है; आपको सूक्ष्मजीवों की सामग्री का वास्तविक मात्रात्मक मूल्यांकन करने की अनुमति देता है जो संगम विकास देते हैं और बहुत छोटी कॉलोनियां बनाते हैं, और आपको प्रकाश माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके इंट्रापॉपुलेशन प्रक्रियाओं का अध्ययन करने की भी अनुमति देता है। 1 बीमार., 1 टैब.
आविष्कार पशु चिकित्सा और स्वच्छता परीक्षा, स्वच्छता और सूक्ष्म जीव विज्ञान के क्षेत्र से संबंधित है, अर्थात् खाद्य उत्पादों के संदूषण और पर्यावरणीय वस्तुओं की स्वच्छता और स्वच्छ स्थिति का निर्धारण।
निकटतम विधि सूक्ष्मजीवों की संख्या निर्धारित करना है सॉसऔर पानी में मांस उत्पाद। ज्ञात विधिउत्पाद के 1 ग्राम में मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या का निर्धारण इस प्रकार है: टीकाकरण के लिए कमजोर पड़ने और मांस-पेप्टोन एगर के लिए एक समाधान तैयार करना; विश्लेषण करना; परिणामों का लेखा-जोखा. 1. हानि मौजूदा विधियह है कि नमूनों को पतला करने के लिए उपयोग किया जाने वाला सोडियम क्लोराइड समाधान (0.85%) केवल स्तनधारी कोशिकाओं के संबंध में असंबद्ध और आइसोटोनिक है, और विश्लेषण के लिए बड़ी मात्रा में पोषक माध्यम, बैक्टीरियोलॉजिकल ग्लासवेयर और कार्य समय का भी उपयोग किया जाता है। इसके अलावा, यह विधि उन सूक्ष्मजीवों की सामग्री के वास्तविक मात्रात्मक मूल्यांकन की अनुमति नहीं देती है जो संगम विकास देते हैं और बहुत छोटी (ओस जैसी) कॉलोनियां बनाते हैं (सामान्य जीवाणु विज्ञान के तरीके। एफ गेरहार्ड एट अल द्वारा संपादित। एम.: " मीर”, 1983, पृ. 442-512)।
आविष्कार का उद्देश्य 0.85% सोडियम क्लोराइड समाधान के बजाय अर्ध-तरल एमपीए के शारीरिक समाधान का उपयोग करके उपयोग किए गए पोषक माध्यम, बैक्टीरियोलॉजिकल ग्लासवेयर और कार्य समय की लागत को कम करना है, इसके बाद पतला की एक बूंद डालना है झिल्ली फिल्टर की सतह पर निलंबन का परीक्षण करें।
इस विधि का अनुप्रयोग इस तथ्य पर आधारित है कि अर्ध-तरल मांस-पेप्टोन अगर (0.6-0.8%) का एक शारीरिक समाधान, जिसमें 1 डीएम 3 आसुत जल, 10 ग्राम पेप्टोन, 5 ग्राम सोडियम क्लोराइड शामिल है। तनुकरण के लिए शारीरिक समाधान के रूप में 0.3 ग्राम निर्जल KN 2 PO 4, 0.6 ग्राम निर्जल NaH 2 PO 4 और 0.6-0.8 ग्राम अगर-अगर का उपयोग किया जाता है; माध्यम का पीएच 7.0-7.2 है, जिसकी बूंदें झिल्ली फिल्टर की सतह पर लागू होती हैं।
तनुकरण घोल के रूप में (0.6-0.8% मीट-पेप्टोन सेमी-लिक्विड एगर) का उपयोग और उसके बाद एक झिल्ली फिल्टर पर पतला परीक्षण निलंबन की एक बूंद डालना एक मूल समाधान है, इसे लागू करना आसान है, जानकारीपूर्ण है, और सांख्यिकीय रूप से विश्वसनीय परिणाम देता है। ; आपको संस्कृति मीडिया, बाँझ बैक्टीरियोलॉजिकल ग्लासवेयर और विश्लेषण समय की खपत को काफी कम करने की अनुमति देता है; आपको सूक्ष्मजीवों की सामग्री का वास्तविक मात्रात्मक मूल्यांकन करने की अनुमति देता है जो संगम विकास देते हैं और बहुत छोटी (ओस जैसी) कॉलोनियां बनाते हैं, और आपको प्रकाश माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके इंट्रापॉपुलेशन प्रक्रियाओं का अध्ययन करने की भी अनुमति देता है।
विश्लेषण के लिए खाद्य उत्पादों के नमूने मौजूदा नियमों के अनुसार लिए जाते हैं। नियामक दस्तावेज़(GOST 18963-73। पीने का पानी। सैनिटरी और बैक्टीरियोलॉजिकल विश्लेषण के तरीके। एम., 1986; GOST 9958-81। सॉसेज उत्पाद और मांस उत्पाद। एम., 1982; GOST 7702.2.1-95। पोल्ट्री मांस, ऑफल और सेमी -तैयार उत्पाद एवियन एम., 1994)।
सस्पेंशन तैयार करने के लिए, खाद्य उत्पादों का एक नमूना एक होमोजेनाइज़र के बाँझ फ्लास्क (ग्लास) में रखा जाता है और 0.85% सोडियम क्लोराइड घोल को चार गुना मात्रा में मिलाया जाता है। समरूपीकरण एक इलेक्ट्रिक मिक्सर में किया जाता है। सबसे पहले, सामग्री को चाकू के घूमने की धीमी गति से टुकड़ों में कुचल दिया जाता है, फिर 2.5 मिनट के लिए 15,000-20,000 आरपीएम पर। होमोजेनाइज़र की अनुपस्थिति में, उत्पाद के 20 ग्राम को 2-3 ग्राम बाँझ रेत के साथ पीसकर, धीरे-धीरे 80 सेमी बाँझ खारा घोल मिलाकर बाँझ चीनी मिट्टी के मोर्टार में परीक्षण निलंबन तैयार करने की अनुमति है। पोषक तत्व मीडिया पर टीकाकरण के लिए, 15 मिनट के एक्सपोज़र के बाद एक बाँझ स्नातक पिपेट के साथ एक निलंबन लिया जाता है कमरे का तापमान. 1 मिली सस्पेंशन में 0.2 ग्राम उत्पाद होता है।
मीट-पेप्टोन एगर को कांच या प्लास्टिक पेट्री डिश (व्यास में 9 सेमी) में डाला जाता है और एगर के ठंडा होने के बाद, बाँझ चिमटी के साथ इसकी सतह पर 5-6 झिल्ली फिल्टर लगाए जाते हैं। आरेख प्रस्तावित विधि का उपयोग करके मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या निर्धारित करने के मुख्य चरणों को दर्शाता है।
अर्ध-तरल एमपीए का 0.6-0.8% शारीरिक समाधान 9 सेमी 3 में बाँझ परीक्षण ट्यूबों में डाला जाता है। फिर, अध्ययन के तहत निलंबन के दशमलव तनुकरण को अर्ध-तरल एमपीए के 9 सेमी 3 शारीरिक समाधान में तैयार किया जाता है। ऐसा करने के लिए, पहले टेस्ट ट्यूब में 1 सेमी 3 टेस्ट सस्पेंशन को पहले टेस्ट ट्यूब से 9 सेमी 3 सेमी-लिक्विड एगर के साथ मिलाएं, टेस्ट सस्पेंशन के 1 सेमी 3 को अच्छी तरह से मिलाएं, इसे दूसरे में स्थानांतरित करें, आदि; . पतला कल्चर का 0.1 मिली (1 बूंद) डिश में एमपीए पर स्थित एक झिल्ली फिल्टर पर लगाया जाता है। आप एक कप में विभिन्न संस्कृतियों के मिश्रण के साथ अगर की 5-6 बूंदें डाल सकते हैं। पतला कल्चर वाली अगर की बूंदें 10-15 मिनट में जम जाती हैं। इसके बाद, पेट्री डिश को 48 घंटों के लिए 37°C पर थर्मोस्टेट में उल्टा कल्चर किया जाता है। व्यवहार्य जीवाणु कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करने के लिए, कालोनियों को अगर बूंदों में गिना जाता है।
मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या निर्धारित करने के लिए, सूत्र का उपयोग करके विकसित कॉलोनियों की संख्या को संस्कृति कमजोर पड़ने की डिग्री से गुणा किया जाता है:
जहां x मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या है,
a विकसित कालोनियों की संख्या है,
n तनुकरण की डिग्री है।
सूक्ष्मजीवों की सामग्री को मापने के लिए जो संगम विकास देते हैं और बहुत छोटी (ओस जैसी) कालोनियों का निर्माण करते हैं, साथ ही प्रकाश माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके इंट्रापॉपुलेशन प्रक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए, झिल्ली फिल्टर पर उगाई गई कालोनियों को 30-40 मिनट के लिए 25% ग्लूटाराल्डिहाइड वाष्प में तय किया जाता है। फिर झिल्ली फिल्टर को कांच की स्लाइड की सतह पर रखा जाता है और उस पर प्रोपलीन ऑक्साइड की कुछ बूंदें डाली जाती हैं। झिल्ली फिल्टर पारदर्शी हो जाता है और यहां तक कि बहुत छोटी (ओस के रंग की) कॉलोनियों को माइक्रोस्कोप या आवर्धक कांच के माध्यम से गिना जा सकता है और, यदि आवश्यक हो, तो माइक्रोफोटोग्राफी ली जा सकती है।
विधि निम्नलिखित में बताई गई है विशिष्ट उदाहरणकार्यान्वयन (तालिका देखें)।
किंवदंती: विधि 1 - निकटतम एनालॉग
विधि 2 - सुझाया गया
उदाहरण 1. उबले हुए सॉसेज में मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या का निर्धारण। मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या का निर्धारण दो तरीकों से किया गया: विधि 1 (प्रोटोटाइप) - विश्लेषण करने के लिए, मांस-पेप्टोन अगर को कांच या प्लास्टिक पेट्री डिश (व्यास 9 सेमी) में डाला जाता है। खाद्य उत्पादों का नमूना वर्तमान नियामक दस्तावेजों (GOST 9958-81। सॉसेज और मांस उत्पाद। एम।, 1982) के अनुसार किया गया था। सस्पेंशन तैयार करने के लिए, खाद्य उत्पादों का एक नमूना एक होमोजेनाइज़र के बाँझ फ्लास्क (ग्लास) में रखा गया था और 0.85% सोडियम क्लोराइड समाधान को चार गुना मात्रा में जोड़ा गया था। समरूपीकरण एक इलेक्ट्रिक मिक्सर में किया गया था। सबसे पहले, सामग्री को चाकू के घूमने की धीमी गति से टुकड़ों में कुचल दिया गया, फिर 2.5 मिनट के लिए 15,000-20,000 आरपीएम पर। पोषक तत्व मीडिया पर टीकाकरण के लिए, कमरे के तापमान पर 15 मिनट के एक्सपोजर के बाद एक बाँझ स्नातक पिपेट के साथ एक निलंबन लिया गया था। 1 मिली सस्पेंशन में 0.2 ग्राम उत्पाद होता है। हमने शारीरिक सोडियम क्लोराइड समाधान में परीक्षण निलंबन के 3 तनुकरण तैयार किए: शारीरिक सोडियम क्लोराइड समाधान को 9 सेमी 3 में बाँझ परीक्षण ट्यूबों में डाला जाता है। फिर, अध्ययन के तहत निलंबन के दशमलव तनुकरण को 9 सेमी 3 शारीरिक सोडियम क्लोराइड समाधान में तैयार किया जाता है। ऐसा करने के लिए, पहले टेस्ट ट्यूब से 9 सेमी 3 सोडियम क्लोराइड के साथ टेस्ट सस्पेंशन का 1 सेमी 3 डालें, टेस्ट सस्पेंशन के 1 सेमी 3 को अच्छी तरह से मिलाएं, इसे दूसरे में स्थानांतरित करें, आदि। और फिर प्रत्येक तनुकरण से 0.1 मिलीलीटर पेट्री डिश (कुल 3 व्यंजन) पर लगाया गया। इसके बाद, पेट्री डिश को 48 घंटों के लिए 37°C पर थर्मोस्टेट में उल्टा करके कल्चर किया गया। व्यवहार्य जीवाणु कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करने के लिए, कालोनियों को अगर की बूंदों में गिना गया। मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या निर्धारित करने के लिए, सूत्र का उपयोग करके विकसित कॉलोनियों की संख्या को संस्कृति कमजोर पड़ने की डिग्री से गुणा किया गया था:
जहां x मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या है,
a विकसित कालोनियों की संख्या है,
n - तनुकरण की डिग्री,
विधि 2 (प्रस्तावित) में कमजोर पड़ने के लिए एक समाधान तैयार करना शामिल है (अर्ध-तरल एमपीए का 0.6-0.8% शारीरिक समाधान, अर्ध-तरल एमपीए का 0.6-0.8% शारीरिक समाधान) और टीकाकरण के लिए मांस-पेप्टोन एगर; विश्लेषण करना; परिणामों का लेखा-जोखा.
विश्लेषण करने के लिए, मांस-पेप्टोन अगर को कांच या प्लास्टिक पेट्री डिश (9 सेमी व्यास) में डाला जाता है, अगर ठंडा होने के बाद, बाँझ चिमटी के साथ इसकी सतह पर 6 झिल्ली फिल्टर लगाए जाते हैं। खाद्य उत्पादों का नमूना वर्तमान नियामक दस्तावेजों (GOST 9958-81। सॉसेज और मांस उत्पाद। एम।, 1982) के अनुसार किया गया था। सस्पेंशन तैयार करने के लिए, खाद्य उत्पादों का एक नमूना एक होमोजेनाइज़र के बाँझ फ्लास्क (ग्लास) में रखा गया था और 0.85% सोडियम क्लोराइड समाधान को चार गुना मात्रा में जोड़ा गया था। समरूपीकरण एक इलेक्ट्रिक मिक्सर में किया गया था। सबसे पहले, सामग्री को चाकू के घूमने की धीमी गति से टुकड़ों में कुचल दिया गया, फिर 2.5 मिनट के लिए 15,000-20,000 आरपीएम पर। पोषक तत्व मीडिया पर टीकाकरण के लिए, कमरे के तापमान पर 15 मिनट के एक्सपोजर के बाद एक बाँझ स्नातक पिपेट के साथ एक निलंबन लिया गया था। 1 मिली सस्पेंशन में 0.2 ग्राम उत्पाद होता है। परीक्षण निलंबन के तीन तनुकरण एमपीए के शारीरिक समाधान में तैयार किए गए थे: अर्ध-तरल एमपीए का 0.6-0.8% शारीरिक समाधान बाँझ परीक्षण ट्यूबों के 9 सेमी 3 भागों में डाला जाता है। फिर, अध्ययन के तहत निलंबन के दशमलव तनुकरण को अर्ध-तरल एमपीए के 9 सेमी 3 शारीरिक समाधान में तैयार किया जाता है। ऐसा करने के लिए, पहले टेस्ट ट्यूब से 9 सेमी 3 अर्ध-तरल अगर के साथ टेस्ट सस्पेंशन का 1 सेमी 3 जोड़ें, टेस्ट सस्पेंशन के 1 सेमी 3 को अच्छी तरह से मिलाएं, इसे दूसरे में स्थानांतरित करें, आदि; . और फिर प्रत्येक तनुकरण का 0.1 मिलीलीटर पेट्री डिश में एमपीए पर स्थित एक झिल्ली फिल्टर की सतह पर लगाया गया था। इसके अलावा, एक पेट्री डिश में 3 तनुकरण रखे गए थे। इसके बाद, पेट्री डिश को 48 घंटों के लिए 37°C पर थर्मोस्टेट में उल्टा करके कल्चर किया गया। व्यवहार्य जीवाणु कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करने के लिए, कालोनियों को अगर की बूंदों में गिना गया। मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या निर्धारित करने के लिए, सूत्र का उपयोग करके विकसित कॉलोनियों की संख्या को संस्कृति कमजोर पड़ने की डिग्री से गुणा किया गया था:
जहां x मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या है,
a विकसित कालोनियों की संख्या है,
n तनुकरण की डिग्री है।
विधि 1 - (9×10 2) और विधि 2 - (10×10 2) द्वारा निर्धारित मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या में महत्वपूर्ण अंतर नहीं था।
उदाहरण 2. मांस में मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की मात्रा का निर्धारण। मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या का निर्धारण दो तरीकों से किया गया: विधि 1 (प्रोटोटाइप) - विश्लेषण करने के लिए, मांस-पेप्टोन अगर को कांच या प्लास्टिक पेट्री डिश (व्यास 9 सेमी) में डाला जाता है। खाद्य उत्पादों का नमूना वर्तमान नियामक दस्तावेजों (GOST 9958-81। सॉसेज और मांस उत्पाद। एम।, 1982) के अनुसार किया गया था। सस्पेंशन तैयार करने के लिए, खाद्य उत्पादों का एक नमूना एक होमोजेनाइज़र के बाँझ फ्लास्क (ग्लास) में रखा गया था और 0.85% सोडियम क्लोराइड समाधान को चार गुना मात्रा में जोड़ा गया था। समरूपीकरण एक इलेक्ट्रिक मिक्सर में किया गया था। सबसे पहले, सामग्री को चाकू के घूमने की धीमी गति से टुकड़ों में कुचल दिया गया, फिर 2.5 मिनट के लिए 15,000-20,000 आरपीएम पर। पोषक तत्व मीडिया पर टीकाकरण के लिए, कमरे के तापमान पर 15 मिनट के एक्सपोजर के बाद एक बाँझ स्नातक पिपेट के साथ एक निलंबन लिया गया था। 1 मिली सस्पेंशन में 0.2 ग्राम उत्पाद होता है। परीक्षण निलंबन के 6 तनुकरण शारीरिक सोडियम क्लोराइड समाधान में तैयार किए गए थे: शारीरिक सोडियम क्लोराइड समाधान को 9 सेमी 3 में बाँझ परीक्षण ट्यूबों में डाला जाता है। फिर, अध्ययन के तहत निलंबन के दशमलव तनुकरण को 9 सेमी 3 शारीरिक सोडियम क्लोराइड समाधान में तैयार किया जाता है। ऐसा करने के लिए, पहले टेस्ट ट्यूब से 9 सेमी 3 सोडियम क्लोराइड के साथ टेस्ट सस्पेंशन का 1 सेमी 3 डालें, टेस्ट सस्पेंशन के 1 सेमी 3 को अच्छी तरह से मिलाएं, इसे दूसरे में स्थानांतरित करें, आदि। और फिर प्रत्येक तनुकरण से 0.1 मिलीलीटर पेट्री डिश (कुल 6 व्यंजन) पर लगाया गया। इसके बाद, पेट्री डिश को 48 घंटों के लिए 37°C पर थर्मोस्टेट में उल्टा करके कल्चर किया गया। व्यवहार्य जीवाणु कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करने के लिए, कालोनियों को अगर की बूंदों में गिना गया। मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या निर्धारित करने के लिए, सूत्र का उपयोग करके विकसित कॉलोनियों की संख्या को संस्कृति कमजोर पड़ने की डिग्री से गुणा किया गया था:
जहां x मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या है,
a विकसित कालोनियों की संख्या है,
n तनुकरण की डिग्री है।
विधि 2 (प्रस्तावित), जिसमें कमजोर पड़ने के लिए एक समाधान की तैयारी (अर्ध-तरल एमपीए का 0.6-0.8% शारीरिक समाधान और अर्ध-तरल एमपीए का 0.6-0.8% शारीरिक समाधान) और टीकाकरण के लिए मांस-पेप्टोन एगर शामिल है; विश्लेषण करना; परिणामों का लेखा-जोखा.
विश्लेषण करने के लिए, मांस-पेप्टोन अगर को कांच या प्लास्टिक पेट्री डिश (व्यास में 9 सेमी) में डाला जाता है, और अगर ठंडा होने के बाद, बाँझ चिमटी के साथ इसकी सतह पर 5-6 झिल्ली फिल्टर लगाए जाते हैं। खाद्य उत्पादों का नमूना वर्तमान नियामक दस्तावेजों (GOST 9958-81। सॉसेज और मांस उत्पाद। एम।, 1982) के अनुसार किया गया था। सस्पेंशन तैयार करने के लिए, खाद्य उत्पादों का एक नमूना एक होमोजेनाइज़र के बाँझ फ्लास्क (ग्लास) में रखा गया था और 0.85% सोडियम क्लोराइड समाधान को चार गुना मात्रा में जोड़ा गया था। समरूपीकरण एक इलेक्ट्रिक मिक्सर में किया गया था। सबसे पहले, सामग्री को चाकू के घूमने की धीमी गति से टुकड़ों में कुचल दिया गया, फिर 2.5 मिनट के लिए 15,000-20,000 आरपीएम पर। पोषक तत्व मीडिया पर टीकाकरण के लिए, कमरे के तापमान पर 15 मिनट के एक्सपोजर के बाद एक बाँझ स्नातक पिपेट के साथ एक निलंबन लिया गया था। 1 मिली सस्पेंशन में 0.2 ग्राम उत्पाद होता है। परीक्षण निलंबन के 6 तनुकरण एमपीए के शारीरिक समाधान में तैयार किए गए थे: अर्ध-तरल एमपीए का 0.6-0.8% शारीरिक समाधान 9 सेमी 3 में बाँझ परीक्षण ट्यूबों में डाला जाता है। फिर, अध्ययन के तहत निलंबन के दशमलव तनुकरण को अर्ध-तरल एमपीए के 9 सेमी 3 शारीरिक समाधान में तैयार किया जाता है। ऐसा करने के लिए, पहले टेस्ट ट्यूब से 9 सेमी 3 अर्ध-तरल अगर के साथ टेस्ट सस्पेंशन का 1 सेमी 3 जोड़ें, टेस्ट सस्पेंशन के 1 सेमी 3 को अच्छी तरह से मिलाएं, इसे दूसरे में स्थानांतरित करें, आदि; . और फिर प्रत्येक तनुकरण का 0.1 मिलीलीटर पेट्री डिश में एमपीए पर स्थित एक झिल्ली फिल्टर की सतह पर लगाया गया था। इसके अलावा, दो पेट्री डिश में 6 तनुकरण रखे गए थे। इसके बाद, पेट्री डिश को 48 घंटों के लिए 37°C पर थर्मोस्टेट में उल्टा करके कल्चर किया गया। व्यवहार्य जीवाणु कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करने के लिए, कालोनियों को अगर की बूंदों में गिना गया। मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या निर्धारित करने के लिए, सूत्र का उपयोग करके विकसित कॉलोनियों की संख्या को संस्कृति कमजोर पड़ने की डिग्री से गुणा किया गया था:
जहां x मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या है,
a विकसित कालोनियों की संख्या है,
n तनुकरण की डिग्री है।
48 घंटों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर पेट्री डिश में खेती के बाद, विधि 1 - (8 × 10 5) और विधि 2 - (7 × 10 5) द्वारा निर्धारित मेसोफिलिक एरोबिक और ऐच्छिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या में कोई खास अंतर नहीं आया।
उपरोक्त उदाहरणों से यह स्पष्ट है कि दोनों विधियों के तुलनात्मक मूल्यांकन में, प्रस्तावित विधि द्वारा निर्धारित सीएफयू की संख्या आम तौर पर स्वीकृत विधि द्वारा निर्धारित की गई संख्या से काफी भिन्न नहीं थी। साथ ही, विकसित विधि के कई फायदे हैं। इस प्रकार, पाँच प्रकार के नमूनों के लिए व्यवहार्य कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करना था: मौजूदा के अनुसार - 98 मिनट; प्रस्तावित विधि के अनुसार - 48 मिनट. पोषक माध्यम की खपत प्रोटोटाइप के अनुसार थी - 420 मिली; प्रस्तावित विधि के अनुसार - 135 मिली. प्रोटोटाइप के अनुसार पेट्री डिश की संख्या 28 टुकड़े थी; प्रस्तावित विधि के अनुसार - 9 टुकड़े।